Білірубін

Білірубін (від лат. bilis - жовч, ruber - червоний; З33Н36Про6N4) - один з жовчних пігментів жовто-оранжевого кольору в розчині і коричневого в кристалах. Білірубін - двухосновная кислота розчинна у хлороформі, бензолі; солі білірубіну з лужними металами розчинні у воді. Білірубін є продуктом розпаду гемоглобіну та інших гемосодержащих білків, що утворюється при відновленні зеленого пігменту жовчі биливердина, протікає головним чином у печінці. Невеликі кількості білірубіну знаходяться в плазмі крові і тканинах (див. Білірубінемія). Накопичення білірубіну в плазмі крові свідчить про порушення системи його виділення - закупорці загальної жовчної протоки, гепатиті, гострому некрозі печінки та ін. Показником цих захворювань є поява в сироватці крові вільного білірубіну, який з реактивом Ерліха (див. Ерліха діазореакція) дає рожеве забарвлення (пряма реакція на білірубін). У нормі білірубін у крові знаходиться в з'єднанні з білками. Зв'язаний білірубін дає забарвлення з реактивом Ерліха тільки після осадження білків сироватки крові етиловим спиртом (непряма реакція на білірубін). См. також Білірубінурія, Жовчні пігменти.

Білірубін - один з жовчних пігментів. В жовчі людини і м'ясоїдних тварин переважає білірубін, який надає жовчі золотисто-жовте забарвлення. В жовчі деяких травоїдних і птахів міститься білівердин. Кристалічний білірубін являє ромбоидальная призми і пластинки, іноді найтонші листочки, що мають забарвлення від світлого оранжево-жовтого до червоно-коричневої; не розчинний у воді, гліцерині і ефірі, слабо розчинний у спирті, краще - у хлороформі, хлорбензоле і в розведених розчинах лугів. Золотисто-жовте забарвлення хлороформных розчинів білірубіну зберігається протягом значного часу тільки в темряві.
Наявність двох карбоксильних груп в молекулі білірубіну обумовлює 1 його кислотні властивості і здатність утворювати солі. Оскільки лужні солі білірубіну розчиняються, а солі двовалентних металів не розчиняються, то білірубін у формі кальцієвої солі (билирубинокислая вапно) може випадати з розчину і входити до складу жовчних каменів. Водно-лужні розчини Б. нестійкі, їх золотисте забарвлення швидко переходить в зелену внаслідок окислення Б. в білівердин.
Для білірубіну, як і для інших жовчних пігментів, характерні реакція Гмеліна (див. Гмеліна проба) і її модифікація для сечі - реакція Розенбаха: 10 мл сечі фільтрують, потім на розправлений фільтр наносять краплю конц. азотної кислоти з домішкою азотистої кислоти. При наявності білірубіну навколо краплі утворюється ряд кольорових кілець; при цьому найбільш яскраво вираженим є зелене кільце, обумовлене утворенням биливердина. Зеленкувате кільце на межі двох рідин утворюється і в тому випадку, якщо на сечу, що містить білірубін, нашарувати 1% спиртовий розчин йоду (реакція Розіна). Б. можна осадити з сечі вапняним молоком. Промивши осад і додавши підкислений соляною кислотою спирт, а потім кілька крапель хлороформу, Б. переводять у розчин. При цьому рідина забарвлюється в жовтий колір (реакція Гупперта - Сальковського). Широко застосовується реакцією на Б. є освіта азокрасителя (зазвичай з диазотированной ex tempore сульфаниловой кислоти), який забарвлює рідину в червоний колір при слабокислій реакції і синій - при сільнокіслой або лужної реакції.
Ця реакція, відкрита Ерліхом (P. Ehrlich), була покладена Ван-ден-Берга (A. A. Himans van den Bergh, 1916) в основу якісного та кількісного визначення Б. в сироватці крові. При якісному визначенні білірубіну до сироватки додають подвійний об'єм води і чверть обсягу диазореактива. Якщо рідина забарвиться в червоний або рожевий колір протягом 1 хв. після додавання реактиву, реакція вважається «прямий швидкої», від 1 до 3 хв.- «прямий сповільненій», якщо ж забарвлення настає тільки в результаті додавання спирту,- «непрямий». Перший вид реакції характерний для паренхіматозних і механічних жовтяниць, дві останні - для здорових і хворих формою гемолітичної жовтяниці. При кількісному визначенні білірубіну білки сироватки крові попередньо заливають подвійним об'ємом спирту і центрифугують. До 1 мл прозорого центрифугата додають 0,25 мл диазореактива і 0,5 мл спирту, а отриману рожеве забарвлення вимірюють колориметрически, використовуючи для порівняння у такої ж реакції стандартні розчини Б. або штучно виготовлені пофарбовані стандарти (розчини сірчанокислого кобальту, роданистого заліза та ін). Кількісне визначення Б. проводиться також методом розведень без осадження білків спиртом (метод Герцфельда - Бокальчука).
Межі вмісту Б. в плазмі здорових людей розцінюються різними авторами неоднаково: від 0,2 до 0,8 мг% (Предтеченський, Боровська і Марголіна, 1950), в середньому 0,75 мг%, але не вище 1,5 мг% [Лемберг і Легг (R. Lemberg, J. W. Legge), 1949]. Підвищений вміст Б. в крові спостерігається при захворюваннях, пов'язаних зі значним розпадом еритроцитів (гемолітична жовтяниця) або з недостатністю вивідною функції печінки (паренхіматозні і механічні жовтяниці). Для дослідження цієї функції печінки запропонована проба з введенням білірубіну. Для цього Б. в кількості 1 мг на 1 кг ваги тіла (але не більше 70 мг) розчиняють у 15 мл 0,1 М розчину вуглекислого натрію і вводять внутрішньовенно. Кров для визначення кількості Б. беруть триразово: до введення Б. (проба I), через 5 хв. після введення (проба II) і ще через 4 години (проба III). Різницю у змісті Б. в пробах II і I приймають за 100% і відносять до неї різницю в пробах III і I. Якщо функція печінки не порушена, ця різниця не перевищує 5% .
Утворення білірубіну відбувається головним чином гемоглобіну крові в ретикулоендотеліальної системи, в купферовских клітинах печінки, селезінці, кістковому мозку. Б., що утворюється як в печінці, так і поза її, приєднує у печінці залишок глюкуронової кислоти в реакції, що протікає за участю уридиндифосфата (УДФ). При цьому виходить глюкуроновый ефір (глюкуронід) Б. Саме ця форма Б. дає пряму реакцію з диазореактпвом («прямий Б.»), тоді як погано розчинний вільний Б. дає реакцію лише після додавання спирту («непрямий Б.»). Жовтяниця новонароджених, мабуть, вызываемся вродженою вадою ферментів, які зумовлюють утворення глюкуроніду білірубіну (УДФ-глюкозодегидрогеназы і трансферази). Органом, що виводить Б. з організму, є печінка.
За добу у людини утворюється 0,2 - 0,3 г Б. Білірубін, виділений з жовчю в кишечник, підлягає за участю мікробної флори відновленню і через проміжні продукти (мез оббили рубін, мезобилирубиноген) перетворюється в стеркобилиноген (уробіліноген), який частково всмоктується в товстому кишечнику, потрапляє в печінку, при порушенні її функції виводиться нирками з сечею. При окисленні ці речовини утворюють стеркобілін (див.) і уробілін (див.). См. також Жовчні пігменти, Жовч.