Борде - Жангу реакція

Борде - Жангу реакція (реакція зв'язування комплементу, РСК) - імунологічна реакція, заснована на властивості комплексу «антиген - антитіло» фіксувати вільний комплемент. РСК протікає у дві фази: 1) адсорбція антитіл на антигенах; 2) вираження реакції в присутності гемолітичної системи (гемоліз). Для постановки РЗК досліджувані об'єкти (антитіла і антигени) поміщають в умови, що забезпечують їх взаємодію в присутності комплементу; потім до аналізованої імунної системи додають «індикатор» - гемолітичну систему. Якщо комплемент фіксувався імунною системою, гемолізу не відбувається (позитивна РСК; рис., а); якщо ж імунна система не фіксувала комплемент і її компоненти не відповідають один одному, гемоліз відбувається (негативна РСК; рис., б). Інгредієнти реакції: 1) випробувана сироватка, інактивована прогріванням протягом 30 хв. при t° 56°; 2) антиген (суспензії бактерій, екстракти органів і тканин, віруси); 3) комплемент (свіжа сироватка морської свинки); 4) гемолітична система (сенсибілізовані еритроцити барана, инкубированные з гемолітичною сироваткою протягом 30 хв. при t° 37°). Для розведення інгредієнтів використовують ізотонічний розчин хлориду натрію. Перший етап РСК триває 60 хв. при t° 37° або 18-20 год. при t° 4-6° (більш чутлива РСК), другий етап - 60 хв. при t° 37°.
В діагностичній практиці і судовій медицині використовують різні модифікації РСК - якісні і кількісні. См. також реакція Вассермана, Серологічні дослідження.

Борде - Жангу реакція [J. Bordet, О. Gengou; син.: реакція відхилення комплементу, реакція фіксації олексина (комплементу), реакція зв'язування комплементу (РСК)] - імунологічна реакція, заснована на властивості комплексу антиген -- антитіло фіксувати вільний комплемент. РСК протікає в 2 фази: 1) адсорбція антитіл на антигенах, 2) вираження реакції (бактериолиз або гемоліз), для якого необхідно присутність комплементу. Залежність бактериолитических реакцій від присутності комплементу дозволяє виявити взаємодія антитіл з антигенами в реакції Борде - Жангу. Показником відповідності антитіл у цій реакції служить фіксація комплементу відповідними імунними системами, що виявляється додаванням до реакційної суміші «індикаторної» гемолітичної системи.
Реакція Борде - Жангу здійснюється в два етапи: спочатку вивчаються антигени і антитіла поміщають в умови, що забезпечують їх взаємодію в присутності комплементу, а після завершення адсорбції до аналізованої імунної системи додається гемолітична система (гемолизин + + еритроцити). При відповідності антигенів та антитіл відбувається їх взаємодія і присутній у реагуючої суміші комплемент фіксується імунною системою. У цьому випадку при додаванні індикаторної системи гемолізу не відбувається через відсутність комплементу (позитивна реакція). Якщо аналізовані антитіла не адсорбуються на антигенах, то комплемент в реагуючої суміші залишається вільним і при додаванні гемолітичної системи здійснюється гемоліз (негативна реакція).
Принцип розробленого Борді і Жангу методу серологічного аналізу ліг в основу численних модифікацій реакції, використовуваної в діагностичній практиці та науково-дослідній роботі.
Звичайна РСК, при якій реєструється 100% лізис еритроцитів, передбачає необхідність попереднього титрування комплементу; останній додається до імунної системи в дозі, що не перевищує необхідної для гемолітичної реакції. Схеми постановки реакції визначаються її метою. У досвіді можуть випробовуватися різні дози антигену при постійному вмісті сироватки і комплементу, різні розведення сироватки при постійних дозах антигену і комплементу і т. д. Інгредієнтами реакції є: 1) випробувана сироватка, прогріта протягом 30 хв. при 56° з метою інактивації присутнього в ній комплементу; 2) антигени (в якості яких використовують суспензії бактерій, екстраговані з них білки, полісахариди та ін), екстракти з клітин рослин і тварин, віруси і т. д., 3) комплемент - свіжа сироватка морських свинок, 4) гемолітична система (сенсибілізовані баранячі еритроцити) - 5% суспензія еритроцитів, які контактували з гемолітичною сироваткою протягом 30 хв. при t° 37°.
Для розведення інгредієнтів використовують фізіологічний розчин NaCl. Антикомплементарность окремих інгредієнтів випробовується в контрольних пробах. Перший етап реакції (адсорбція антитіл) здійснюється при t° 37° протягом 60 хв. або при 4-6° протягом 18 - 20 год. (РЗК на холоді). В останньому випадку відбувається більш повна фіксація комплементу, що збільшує чутливість методу. На другому етапі реакційні суміші витримують при t° 37°. Результат реєструють в момент 100% гемолізу у контрольних пробах.
В діагностичній практиці використовують активні, а також «непрямі» методи реакції зв'язування комплементу, які є модифікаціями реакції Борде - Жангу. У перших з них показником реакції служить зміна вмісту комплементу в випробуваної сироватці. Другі засновані на тому, що при деяких захворюваннях сироватки не містять комплементсвязывающих антитіл, але здатні запобігати реакції з сироватками, що володіють комплементзв'язуючою активністю.
Найбільша чутливість і точність властива кількісної РСК, в якій реєструють гемоліз у зоні часткового лізису. Чутливість даної модифікації реакції Борде - Жангу обумовлена тим, що в середній зоні лізису (20-80%) відношення кількості комплементу до кількості лизируемых еритроцитів має лінійний характер. В основі цієї реакції лежить спеціальний метод титрування комплементу, кількість якого виражається в 50% одиницях (Сн50) і підраховується на основі рівняння Крога, що представляє хід гемолізу в зоні часткового лізису.
Ступінь гемолізу встановлюється за допомогою спектрофотометра або фотоелектроколориметра.
Кількісна РСК в свою чергу має ряд модифікацій. Зокрема, микрометод забезпечує більшу точність визначень при малій витраті інгредієнтів.