Диференційно-діагностичні середовища - спеціальні суміші поживних речовин, що застосовуються для визначення видової приналежності мікробів та вивчення їх властивостей. При зростанні бактерій на диференціально-діагностичних середовищах протікають хімічні процеси, зумовлені наявністю у мікробної клітини різних ферментів. Одні з них здатні розщеплювати білки, інші - вуглеводи, треті - викликати реакції окислення та відновлення і т. д. Завдяки дії ферментів в диференційно-діагностичної середовищі відбуваються відповідні зміни.
Диференційно-діагностичні середовища можна розділити на чотири основні групи.
Рис. 1-6. Різні форми розщеплення желатини. Рис. 7 - 9. Рідка середовище з вуглеводом і індикатором Андраде: рис. 7 - відсутність ферментації; рис. 8 - ферментація з утворенням кислоти; рис. 9 - ферментація з утворенням кислоти і газу. Рис. 10 - 12. Напіврідка середовище з вуглеводом і індикатором BP (з сухого живильного середовища): рис. 10 - відсутність ферментації; рис. 11 - ферментація з утворенням кислоти; рис. 12 - ферментація з утворенням кислоти і газу. Рис. 13-15. Штучна лакмусовий сироватка Зейтцу: рис. 13 - відсутність ферментації; рис. 14 - ферментація з утворенням кислоти; рис. 15 - ферментація з утворенням лугу. Рис. 16 і 17. Молоко з метиленовим синім: рис. 16 - відсутність редукції; рис. 17-редукція. Рис. 18 і 19. Середовище Сімонса: рис. 18-відсутність асиміляції цитрату; рис. 19 - асиміляція цитрату. Рис. 20 - 24. Лакмусовое молоко: рис. 20 - відсутність ферментації; рис. 21 - ферментація з утворенням кислоти; рис. 22 - ферментація з утворенням лугу; рис. 23 - пептонизация; рис. 24 - редукція. Рис. 25. Розрідження згорнутої сироватки (у світлі). Рис. 26. Гемоліз на кров'яному агарі (у світлі). Рис. 27. Кров'яне середовище з теллуритом калію.
1. Середовища, що містять білок та виявляють здатність мікробів розщеплювати білки (протеолітичні Властивості): м'ясо-пептонная желатину «стовпчиком», згорнута кінська або бичача сироватка, молоко, кров'яний агар. При посіві бактерій проколом у м'ясо-пептонную желатину, «стовпчиком» у разі розщеплення білка спостерігають розрідження середовища. При посіві на середовище зі згорнутої сироваткою розщеплення білка визначають за розрідження середовища і утворення поглиблень на її поверхні. Розщеплення мікробом молока виявляється просвітленням або розчиненням спочатку згорнутого молока. Наявність гемолітичної активності досліджуваної культури перевіряють посівом її в чашку Петрі на спеціальний кров'яний агар. В результаті руйнування еритроцитів навколо колоній (наприклад, гемолітичного стрептокока або стафілокока) утворюються зони просвітлення.
2. Середовища для виявлення здатності мікробів розщеплювати вуглеводи і высокоатомные спирти (середовище Ендо, Левіна середа, Расселла середа, Дригальского - Конраді середа, Рапопорт - Вайнтрауба середа, Шустовой середовище). Для виявлення цих властивостей мікроорганізмів застосовують також «строкатий», тобто серію пробірок, що містять поживні середовища, що містять різні вуглеводи, багатоатомні спирти і індикатор. В якості індикаторів користуються лакмусовим настойкою або бромтимоловым синім. Розкладання будь-якого з вуглеводів з утворенням кислоти виявляють за зміною кольору індикатора, освіта газу - щодо заповнення газом і спливання спеціального скляного поплавця в рідкому середовищі. Або застосовують напіврідкі Гисса середовища (див.) з 0,5% агару з відповідними цукрами і індикатором Андраде. Після посіву мікроба на ці середовища освіта кислоти виявляють почервонінням середовища, а освіта газу - за його появи бульбашок в агарі або з розриву і переміщення вгору агарового стовпчика. До диференціально-діагностичних середовищ другої групи відносять також крохмальний агар, службовець для визначення здатності мікробів розщеплювати крохмаль, середу Кларка та ін
3. Середовища, на яких виявляється здатність мікробів знебарвлювати барвники, додані до бульйону: метиленовий синій, тионин, лакмус, індигокармін, нейтральний червоний або інші (середа Ротбергера, середа Омелянського). До третьої групи відносять також середовища з нітратами, службовці для визначення здатності мікробів відновлювати солі азотної кислоти (нітрати) в солі азотистої кислоти (нітрити) і далі в аміак або вільний азот.
4. Середовища, що виявляють здатність мікробів засвоювати речовини, що не засвоюються іншими мікробами, наприклад середовище з лимоннокислым натрієм (цитратный агар Сімонса) для відмінності кишкової палички, яка позбавлена здатності асимілювати цю середу, від інших бактерій кишкової групи або середовище з олеиновокислым натрієм для диференціації дифтерійної палички від хибно дифтерійної і дифтероїдів (агар Энжеринга).
До диференціально-діагностичних середовищ відносять також середовища для диференціації анаеробів, теллуритовые середовища для диференціації дифтерійних бактерій, середовища з сечовиною, лужні середовища (Додання агар) для культивування холерного вібріона та ін См. також Ідентифікація мікробів.
