Ерліха реакція

Ерліха реакція - кольорова реакція на індол, який утворюється за рахунок розкладання бактеріями триптофану. Реакція Ерліха застосовується для диференціальної мікробіологічної діагностики: утворюють індол (реакція Ерліха позитивна) Escherichia coli, Proteus, холероподібні вібріони та деякі інші; не утворюють індолу (реакція Ерліха негативна) сальмонели (включаючи бактерії черевного тифу і паратифів), шигели та багато ін.
Індол, реагуючи з диметиламінобензальдегідом, утворює сполуку, забарвлену в червоний колір. Реакцію проводять наступним чином: у бульйонну культуру бактерій вносять 1-2 мл ефіру, сильно струшують і обережно по стінках пробірки доливають 2 мл розчину № 1 (4 р р-диметиламинобензальдегида + 380 мл 96% етилового спирту + 80 мл концентрованої соляної кислоти) і 2 мл розчину № 2 (насичений розчин персульфата калію). У тому випадку, якщо не пізніше ніж через 5 хвилин ефірний шар червоніє, реакція вважається позитивною.

Ерліха реакція (P. Ehrlich) - реакція визначення індолу. Здатність деяких видів мікроорганізмів до индолообразованию використовується для диференціальної мікробіологічної діагностики. В результаті життєдіяльності бактерій пептон живильного середовища розпадається на амінокислоти, одна з яких (триптофан) під впливом триптофаназы розщеплюється на індол, піровиноградну кислоту і аміак. Для виявлення індолу найчастіше користуються реакція Ерліха в модифікації Беме (A. Bohme), що дозволяє виявити індол навіть у розведенні 1:1 000 000. В основі цієї реакції лежить здатність безбарвного індолу в присутності окислювача (персульфата калію) утворювати з парадиметиламинобензальдегидом комплексне з'єднання червоного кольору. По Фішеру (Е. Fischer), в результаті реакції об'єднуються дві молекули індолу з однією молекулою парадиметиламинобензальдегида і виділяється одна молекула води. Реакція протікає відповідно формулі:

За Фрейнду і Лєбаху (М. Freund, Lebach), поряд з цією реакцією може відбуватися з'єднання однієї молекули індолу з однією молекулою парадиметиламинобензальдегида, але тільки в безводній середовищі. Отримане в даному випадку з'єднання буде мати формулу:

                           

Для проведення реакції Ерліха необхідні розчин № 1 - парадиметиламинобензальдегид (4 г), етиловий спирт 96° (380 мл), концентрована соляна кислота (80 мл) і розчин № 2 - насичений при нагріванні розчин персульфата калію.
При визначенні індолу в добовій культурі на бульйоні Хоттингера або п'ятидобової культурі на 1% пептонной воді додають 1-2 мл ефіру, струшують і обережно нашаровують по стінці пробірки спочатку 1-2 мл розчину №1, а потім таку ж кількість розчину № 2. При наявності індолу не пізніше ніж через 5 хв. забарвлюється весь ефірний шар або нижня частина його. Поява забарвлення в більш пізній термін або почервоніння тільки бульйону при безбарвному шарі ефіру не є показником присутності в живильному середовищі індолу.
Утворюють індол наступні бактерії: Escherichia coli, Proteus, Vibrio comma і холероподібні вібріони, Klebsiella ozaenae і шигели: Штуцер-Шмітц; Лардж - Сакс 7, 8; Флекснер; Бойд 5, 7, 9, 11, 13, 15.
Не утворюють індолу сальмонели (включаючи бактерії черевного тифу і паратифів), шигели (Григор'єва-Шига; Зонне, Ньюкасл; Бойд 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 14), Соrynebacterium diphtheriae і мн. ін.