Гістологічна техніка

Гістологічна техніка - сукупність способів обробки біологічних об'єктів (клітин, тканин, органів) для мікроскопічного дослідження їх будови.
Живі тканини доступні прямому спостереженню у прижиттєвих умовах і в культурах тканин, коли шматочки органів вирощуються в штучної живильному середовищі або в організмі піддослідної тварини (наприклад, у підшкірній клітковині).
Для вивчення фіксованих препаратів використовують шматочки тканини і органу, отримані під час операції або при розтині. Для дослідження беруть як можна більш свіжий матеріал. Досліджувані шматочки тканини не повинні бути великими, інакше фіксуюча рідина не проникне в їх товщу. При приготуванні препаратів слід попередити зморщування і деформацію шматочків, особливо оболонок.
Фіксація об'єктів дослідження є одним з найважливіших етапів обробки. Правильна фіксація тканин полегшує подальшу гістологічну обробку, дозволяє максимально зберегти структуру об'єктів і попередити її зміни в подальшому. Найбільш поширені фіксатори - розчини формаліну, алкоголь, хромати, осмиевая кислота, а також їх різні поєднання. Декальцинацию об'єктів (кістки, зуби) проводять в розчинах азотної, соляної, мурашиної кислот. Знежирення досягається обробкою об'єктів у спиртах висхідної фортеці, карболксилоле, ефірі і хлороформі. Оброблені шматочки піддають ущільнення, укладаючи їх в парафін, целлоидин, желатину.
Після ущільнення зрізи (товщиною 3-15 мк) виготовляють на мікротоми(див.). Зрізи нефіксованих об'єктів отримують на замораживающем мікротоми.
Для кращого виявлення деталей будови шматочки або готові зрізи фарбують. Використовувані в гістологічної техніки барвники поділяються на кислі, основні та нейтральні. Найбільш поширені гематоксилін, еозин, кармін, фуксин, азур, толуїдиновий синій, конго червоний. Виборче виявлення тканинних структур досягається також імпрегнацією (просочуванням) їх солями важких металів (азотнокислим сріблом, хлорним золотом, осміем, свинцем).
Особливе місце займають методики гистохимического дослідження, що дозволяють вивчати обмінні процеси в тканинах. Велике значення придбали методики гисторадиографии, що дають можливість досліджувати динаміку структурних змін.