Реакція гальмування міграції лейкоцитів (РТМЛ), микрометод А. Р. Артемової (1973)

Реакція проводиться зазвичай з бактеріальними та лікарськими алергенами, іноді з харчовими. В реакції використовуються гепаринизированная кров хворого і випробувані алергени в тій же концентрації, що застосовується для шкірного тестування.
Реактиви та обладнання: середовище 199, 0,9% розчин хлористого натрію, гепарин, цемент «фосфат», термостат, спіральна центрифуга, мікроскоп, годинникове скло, міграційні капіляри Трошанова.
Техніка. У стерильну пробірку, змочену гепарином (1-2 краплі), набирають 3-5 мл крові з вени хворого і швидко перемішують. Потім гепаринизированную кров в обсязі 0,2 мл наносять на два часових скла, одне з яких є контрольним. На дослідне додають 0,05 мл алергену, а контрольні-0,05 мл середовища 199 або 0,9% розчину хлористого натрію, що використовується для розведення алергену. Суміші перемішують окремими скляними паличками. У кожну суміш занурюють кінець пластинки, містить 5 прямокутних микрокапилляров з поперечним перерізом 0,4 X 0,15 мм (міграційні капіляри Трошанова). Кінці капілярів замазують свіжоприготованим цементом «фосфат» (модифікації В. П. Замотаєва з співавт., 1974) і центрифугують в спіральної центрифузі ВУС протягом 5 хвилин при 2800 об/хв. В результаті центрифугування над шаром еритроцитів утворюється шар лейкоцитів. Потім капіляри позначають у термостат при 37° С 18-20 годин під кутом 10°. Дослідження дослідного та контрольного препаратів проводять під мікроскопом при малому збільшенні об'єктива (Х20) з допомогою вимірювальної сітки, що вставляється в окуляр (X 4).
Оцінка результатів. Визначається зона міграції лейкоцитів у дослідних і контрольному микрокапиллярах. Розмір зони міграції лейкоцитів оцінюють за кількістю квадратів сітки, повністю заповнених лейкоцитами. Для кожної проби визначають середню величину з показників 5 контрольних і 5 досвідчених микрокапилляров з подальшим підрахунком індексу гальмування міграції лейкоцитів (ИТМЛ) за формулою
ИТМЛ = [(Пк - З)/Пк] ·100%,
де Пк - середній показник зони міграції лейкоцитів 5 контрольних -5 досвідчених микрокапилляров (табл. 5).
Реакція оцінюється як негативна, якщо ИТМЛ в дослідному капілярі відрізняється від контрольного менш ніж на 30%, слабо позитивна ( + ) при розходженні ИТМЛ на 30-40% і позитивна (++), якщо різниця більше 50%.