Оспенная вакцина

Оспенная вакцина жива вакцина для профілактики натуральної віспи. Для виробництва також віспяною вакцини використовують вірус коров'ячої віспи і осповакцины. Останній є вірусом натуральної віспи, ослабленим внаслідок багаторазових пасажів через організм корів та інших тварин, в результаті чого він втратив здатність викликати віспу, але при введенні в організм людини створює імунітет до неї. Для виробництва також віспяною вакцини використовують корів, телят, овець, іноді буйволів, кроликів, а також курячі ембріони та культури тканин. Тваринам виголюють шкіру і роблять безліч дрібних надрізів, які втирають вірус коров'ячої віспи або вірус осповакцины. Через 4-5 днів, коли утворюються оспенные пустули, тварин забивають, шкіру обробляють фенолом, обмивають водою і зскрібають віспини. Суспензія подрібненого зіскрібка віспин називається оспенным детритом. Оспенная вакцина може бути рідкою (коли вісп'яний детрит розводять у 4-5 разів гліцерином) чи сухою (коли до детриту додають 10% білкового наповнювача, а потім розливають в ампули і піддають вакуумної сушки). Запаяна ампула сухої також віспяною вакцини при зберіганні в холодильнику (t° 2 - 4°) зберігає свою активність не менше 12 місяців, тоді як рідка вакцина - не більше 3 місяців. У СРСР в основному готували суху оспенную вакцину. Перед проведенням щеплення віспи (див.) суху оспенную вакцину розводять гліцерином, який зазвичай додається до кожної ампулі також віспяною вакцини.

Оспенная вакцина (vaccinum variolae) - жива вакцина для профілактики натуральної віспи, у виробництві якої використовують віруси коров'ячої віспи і осповакцины (вакцини), споріднені в антигенному відношенні вірусу натуральної віспи.
Вірус коров'ячої віспи - збудник віспи корів, характерним симптомом якої є освіта на вимені корів бульбашок, що містять вірус. Заражаючись цим вірусом при доїнні хворих віспою корів, людина набуває імунітету до натуральної віспи.
Походження вірусу осповакцины недостатньо ясно. Його розглядають як вірус натуральної віспи, змінився під впливом пасажів через організм корів чи інших тварин і втратив здатність викликати віспу у людини, але зберіг иммунизирующую здатність. Практично вірус осповакцины ототожнюють з вірусом коров'ячої віспи, так як відмінності між ними виявляються лише при спеціальних методах дослідження.
Вірус коров'ячої віспи був вперше використаний для попередження натуральної віспи Дженнером (Е. Jenner, 1796). Оспенную вакцину готують або в рідкому вигляді (суміш оспенного матеріалу з гліцерином), або у вигляді сухої вакцини, яку перед вживанням розводять гліцерином. Для виробництва також віспяною вакцини можуть бути використані різні тварини (корови, телята, вівці, рідко - буйволи, кролики), курячі ембріони та культури тканин (див.). О. в., одержувану шляхом нашкірного зараження тварин, прийнято називати дермальной, на відміну від також віспяною ововакцины, підготовку на курячих ембріонах, і тканинної О. в., виготовленої з використанням культур тканин in vitro. В якості виробничих штамів використовують вірус коров'ячої віспи або осповакцины. Штами повинні бути генетично однорідні, досить иммуногенны і здатні викликати утворення доброякісних віспин на шкірі щеплених людей, кроликів і на хоріон-аллантоисной оболонці курячих ембріонів.
Для отримання дермальной також віспяною вакцини в СРСР використовують корів і телят, рідше ослів. Після вибривання області живота тварин інфікують в скарифицированную шкіру вакцинным штамом, ретельно втираючи прищепний матеріал в надрізи шкіри. Через 4-5 днів в період максимального вмісту вірусу в розвинулися оспинах тварин вбивають. Зняту шкіру обробляють фенолом, обмивають водою і зскрібають віспини. Зішкріб ретельно подрібнюють і отримують найменшу зваж - вісп'яний детрит. Для виготовлення рідкого препарату детрит розводять гліцерином, так що кінцевий продукт являє суміш 1 ч. детриту з 4-5 ч. 40-80% гліцерину. Для виготовлення сухої дермальной також віспяною вакцини до оспенному детриту додають наповнювач - суміш курячого білка з сахарозою, рідше 10% розчин желатини або кінської сироватки. Вісп'яний детрит з наповнювачем розливають в ампули, висушують в замороженому стані під вакуумом (див. Ліофілізація) і запаюють. Суха О. в. більш стійка до високих температур і при зберіганні на холоді зберігає активність не менше 12 міс. При цих же умовах рідка вакцина придатна не більше 3 міс. Тому в СРСР готують тільки суху дермальних О. в.
Після багаторазових пасажів від одного теляти іншому вакцинний штам може ослабнути. Вірулентні властивості відновлюють, проводячи штам через сприйнятливий організм іншого виду. В СРСР використовують два методу збереження вакцинних штамів: пасажі теля-кролик-теля і теля-осел-теля. Прищепний матеріал, отриманий при пасажі через організм кролика, називається лапіної, через організм осла - азининой, через організм людини - ретровакциной.
Оспенную ововакцину готують шляхом зараження 12-денних курячих ембріонів в аллантоисную порожнину вірусом дермовакцины. Через 72 години після зараження хоріон-аллантоисную витягають оболонку, ретельно гомогенізують і змішують зі стабілізатором (10% желатину, 50% курячий білок або молоко).
Тканинну оспенную вакцину отримують зараженням культур тканин органів або зародків здорових тварин. Культуральну рідину збирають у період повної дегенерації заражених клітин і змішують з наповнювачем (5% пептон або суміш жовтка курячого яйця з сахарозою). Ововакцина і тканинна вакцина випускається у сухому вигляді.
Оцінку якості О. в. проводять шляхом визначення бактеріального забруднення, нешкідливості, імуногенності та термостабільності. О. в. повинна бути повністю вільна від патогенних бактерій, що встановлюють, заражаючи нею мишей або морських свинок. У дермальной О. в. допускається присутність непатогенних для людини мікробів, однак вони повинні утворювати не більше 1000 колоній при посіві 1 мл вакцини. Для придушення мікрофлори допускається використання антибіотиків в мінімальних кількостях.
Специфічну активність готової О. в. перевіряють на кроликах (метод Грота) і морських свинках (метод Гінса). При оцінці активності за першим методом кроликам внутрішньошкірно вводять випробуваний препарат в різних розведеннях. Вакцина вважається придатною, якщо через 96 год. сума поперечників інфільтратів, що утворилися на місцях введення вакцини, не менше 30-35 мм. При визначенні активності за методом Гінса заражають морських свинок (на скарифицированную рогівку) різними концентраціями прищепного матеріалу. Вакцина, що викликає в розведенні 1 : 10 000 і вище виражений кератит, придатна до вживання. Одним із способів перевірки також віспяною вакцини є також первинна вакцинація дітей. О. в. вважається придатною, якщо вона дає не менше 90% позитивних реакцій за кількістю дітей і 70% успіху за кількістю прищеплених надрізів.
Крім цих методів, ВООЗ рекомендує визначати активність О. в. зараженням кроликів на скарифицированную шкіру і курячих ембріонів на хоріон-аллантоисную оболонку. О. в. вважається придатною, якщо при нанесенні на скарифицированную шкіру кролика в розведенні 1:10 000 викликає через 4-7 днів характерні поодинокі оспенные везикули, а в розведенні 1 :1000 - зливні поразки. Визначення активності на курячих ембріонах зводиться до зараження 12-денних зародків на хоріон-аллантоисную оболонку.
Термостабільність сухих оспенных вакцин визначають витримуванням сухих препаратів при 37° протягом 4 тижнів; після цього терміну О. в. повинна відповідати зазначеним вище вимогам.
В СРСР для профілактики віспи використовується переважно дермальна О. в., найбільш апробована практикою. У США, Швейцарії поряд з дермовакциной застосовують ововакцину. Тканинну О. в. застосовують у Швеції, Голландії та Мексиці.