Резус-фактор - вроджене групове властивість еритроцитів людини, зумовлене присутністю в них антигенів резус. Резус-фактор не залежить від ознак інших групових систем, передається у спадок і не змінюється протягом усього життя; позначається символом Rh.
Резус-фактор міститься в еритроцитах 85% людей, кров яких називається резус-позитивною (Rh+)- Близько 15% людей не має резус-фактором, і кров їх називається резус-негативною (Rh-). Існує кілька різних антигенів (див.) системи резус, які можуть перебувати в еритроцитах людей разом чи порізно. Нормальні природні антитіла до антигенів системи резус, як правило, не зустрічаються. Проте в результаті імунізації людини резус-фактором під час вагітності або при багаторазових переливанні резус-позитивної крові резус-негативного реципієнту можуть утворитися імунні антитіла антирезус неповної або повної форми. При трансфузії (див. Переливання крові) резусположительной крові резус-негативного реципієнту, що містить резус-антитіла, настає гемоліз (див.) еритроцитів донора, що тягне за собою трансфузійної реакції або ускладнення. Для профілактики подібних ускладнень необхідно переливати резус-негативного реципієнту тільки резус-негативну кров і перед переливанням проводити пробу на сумісність не тільки за групами крові, але й по резус-фактору.
Методика визначення резус-фактора в еритроцитах різна і залежить від форми антитіл, що містяться в стандартній сироватці. При неповних антитіл найбільш часто застосовується реакція аглютинації (конглютинации) в різних колоїдних середовищах (нативної сироватці, желатині), реакція з протеолітичними ферментами та ін
 Рис. 1. Визначення резус-фактора в чашках Петрі. Досліджувані еритроцити резус-позитивні. |
Для постановки реакції конглютинации в сироваткової середовищі, крім досліджуваних еритроцитів, необхідно мати дві серії стандартних сироваток антирезус і контрольні зразки резус-позитивних і резус-негативних еритроцитів. Реакція проводиться на чашках Петрі, куди наносяться в шість точок по 2 краплі стандартної сироватки двох різних серій (3 точки однієї і 3 точки іншої серії). Потім у перші точки різних серій стандартної сироватки додається по 1 краплі 5-10% суспензії контрольних резус-позитивних еритроцитів, у другі точки - по 1 краплі 5-10% суспензії контрольних резус-негативних еритроцитів, треті точки - така ж кількість досліджуваних еритроцитів. Після змішування (скляними паличками) сироваток в кожній точці з доданими еритроцитами чашку поміщають у водяну баню при t° 46-48° на 7-10 хв. Про результати судять по наявності або відсутності аглютинації в краплях з досліджуваними еритроцитами(рис. 1),розглядаючи їх над джерелом світла.
 Рис. 2. Результати реакції визначення резус-фактора з застосуванням желатини: 1 - наявність аглютинації; 2 - відсутність аглютинації. |
Реакція конглютинации з желатиной зазвичай проводиться в пробірках місткістю 8-10 мл В штатив установлюють 2 ряди пробірок для двох різних серій стандартної сироватки. В контрольні пробірки кожного ряду вводять по 1 краплі стандартних резус-позитивних і резус-негативних еритроцитів, інші пари пробірок - досліджувані еритроцити. Дослідження можна проводити як з відмитими, так і з неотмытыми еритроцитами. Потім в кожну пробірку додають по одній краплі підігрітої до розрідження желатини (10% розчин) і по одній краплі стандартної сироватки. Вміст пробірок змішують шляхом струшування і поміщають у водяну баню при t° 46-48° на 5 хв, після закінчення яких у кожну пробірку доливають 5-8 мл підігрітого до t° 46-48° фізіологічного розчину NaCl і розглядають на світло, визначаючи наявність або відсутність аглютинації (рис. 2).
При дослідженні сироваткою, що містить повні антитіла, застосовують метод аглютинації в сольовому середовищі в маленьких пробірках (висотою 2-2,5 см, діаметром 0,5 - 0,6 см). У штатив установлюють 2 ряди пробірок (за кількістю досліджуваних зразків і 2 для контролю), в які вводиться по 2 краплі стандартної сироватки і по 1 краплі
2% суспензії еритроцитів, попередньо двічі відмитих фізіологічним розчином NaCl. Вміст пробірок струшують і поміщають в термостат при t° 37° на 1 годину.
Про резус-приналежності судять за формою осаду, який розглядають через лупу з 5-7-кратним збільшенням над джерелом світла, закритим матовим склом. Результати при всіх цих методах враховують в залежності від наявності чи відсутності аглютинації в еритроцитах досліджуваних після перевірки контрольних зразків.
Резус-фактор в акушерстві. Резус-конфлікт під час вагітності зазвичай розвивається у тих випадках, коли плід у жінки з резус-негативною кров'ю успадкує резус-фактор батька (плід Rh+). Еритроцити плоду, що містять резус-фактор, можуть в незначній кількості проникати через дефекти плаценти в кров матері. В результаті цього в організмі матері утворюються резус-антитіла, які, проходячи через плаценту в кров плоду, викликають у нього розвиток гемолізу. Під час першої вагітності резус-конфлікт зазвичай не призводить до розвитку гемолітичної хвороби. При наступних вагітностях резус-позитивним плодом або при помилковому переливанні резус-позитивної крові резус-негативній жінці кількість антитіл у крові матері зростає. Найбільш високий вміст антитіл зазвичай спостерігається перед пологами.
Під час вагітності всім жінкам слід проводити дослідження на присутність в крові резус-фактора, у разі відсутності якого слід обстежити чоловіка вагітної. Всіх вагітних жінок з резус-негативною кров'ю (чоловік з резус-позитивною кров'ю) в жіночих консультаціях беруть на особливий облік і періодично проводять дослідження крові на резус-антитіла. Для профілактики і терапії резус-конфлікту показано проведення неспецифічної десенсибілізуючої терапії (загальне ультрафіолетове опромінення, вітаміни, хлористий кальцій, вікасол та інші). Ці заходи не можуть повністю запобігти резус-конфлікту, але дещо послаблюють його.
При зростанні титру резус-антитіл у крові показане дострокове розродження. В останні роки запропоновано новий метод профілактики гемолітичної хвороби новонароджених, заснований на введенні вперше народжуючим безпосередньо після пологів імуноглобуліну. Цей препарат містить резус-антитіла, які блокують резус-антигени і тим самим запобігають вироблення антитіл в організмі жінки.
При народженні плода з ознаками гемолітичної хвороби проводиться комплекс лікувальних заходів (див. Гемолітична хвороба новонароджених.).
Резус-фактор - імунологічне властивість крові людей, обумовлене наявністю агглютиногенов, присутніх в еритроцитах людини незалежно від чотирьох груп крові. Ландштейнер і Вінер (К. Landsteiner, A. Wiener) при імунізації кролів еритроцитами мавп Macacus rhesus встановили, що сироватка кроликів придбала здатність агглютинировать еритроцити не тільки даних мавп, але і більшості людей. Так було відкрито існування в еритроцитах людини нового агглютиногена, що отримав назву резус-фактора (Rh).
Резус-фактор передається у спадок. При відсутності у батьків резус-фактора його не може бути у дітей. Наявність резус-агглютиногена виявляється вже у 3-4-місячного ембріона і залишається постійним протягом всього життя.
Уявлення про резус-факторі не може бути обмежена тільки одним агглютиногеном Rh. Останній тісно пов'язаний з іншим агглютиногеном, позначеним як Hr, і складає з ним загальну систему Rh - Hr, включає три різновиди Rh-агглютиногена - Rh0, rh', rh" і три різновиди Hr-агглютиногена - hr0, hr', hr" (номенклатура Вінера). Застосовується також номенклатура Фішера - Рейсу, в якій агглютиногены Rh позначаються прописними літерами D, С, Е, а агглютиногены Hr - відповідними малими d, с, е (табл. 1).
До системи агглютиногенов, складових резус-фактор, відносяться також більш рідкісні варіанти агглютиногенов D, С і Е: Du, Cw, u, Зх, Eu, E,w, f тощо
Всі агглютиногены системи Rh - Hr є антигенами: потрапляючи в організм людини, вони здатні імунізувати його, викликаючи утворення Rh-антитіл і Hr-антитіл різної активності, і реагувати з цими антитілами. Найбільше практичне значення мають агглютиногены Rh0, rh', rh" і hr'.
Різновиди Rh - Hr-агглютиногенов зустрічаються в еритроцитах окремо і в комбінаціях між собою; 8 варіантів цих поєднань представлені в табл. 2.
Агглютиноген hr міститься в еритроцитах приблизно у 83% людей (hr-позитивних) і відсутній у решти 17% (hr-негативних). У число hr-позитивних входять всі Rh-негативні. Людей, у крові яких немає ніяких різновидів резус-агглютиногенов, налічується 12,5-13%.
При попаданні в організм людини будь-якого відсутнього у нього агглютиногена виробляються відповідні антитіла: анти-Rho, анти-hr' і т. д. При введенні двох антигенів можуть виробитися два антитіла: анти-Rh0rh', анти-Rh0rh" та ін. Найбільшою антигенної активністю володіє агглютиноген Rh0.
Сироватки, що містять різні Rh-hr-антитіла, дають реакцію аглютинації з досліджуваними еритроцитами не однаково часто, а саме: сироватка анти-Rho-85%, антн-rh'-70%, анти-rh"- 32%, анти Rh0rh'-87%, aHTH-Rh0rh" - 85%, анти-hr - 80%.
Сироватки, що містять резус-антитіла високої активності, використовуються для визначення резус-фактора в крові. Для отримання сироваток в пологових будинках беруть кров резус-негативних жінок, сенсибілізованих вагітностями (див. нижче).
Для визначення резус-фактора в еритроцитах бажано одночасно застосовувати антирезус-сироватки 2-3 серій. При змішуванні з досліджуваними еритроцитами сироватки викликають їх аглютинацію (кров резус-позитивна) або не наступає аглютинація (кров резус-негативна). Для встановлення різновиди агглютиногенов необхідно продовжити дослідження монотиповыми сироватками (анти-rh', анти-rh" та ін).
Щоб отримати точні результати при визначенні резус-фактора, необхідно дотримуватися тепловий режим (45-47°), застосовувати постійні кількісні співвідношення сироватки і еритроцитів (2 : 1), правильно виготовити емульсію еритроцитів і точно витримувати час інкубації.
До числа найбільш поширених відноситься конглютинирующая методика визначення на чашках Петрі і в пробірках із застосуванням желатини.
Для конглютинирующей методики необхідні сироватки антирезус не менше двох серій, однойменної з досліджуваною кров'ю групи, і 5-8 мл досліджуваної крові, взятої без стабілізатора. На чашку Потри наносять по 2 краплі сироватки антирезус різних серій. Потім до всіх серій сироваток додають по 1 краплю досліджуваних еритроцитів у вигляді суспензії у власній сироватці. Краплі розмішують скляною паличкою, і чашку поміщають у водяну баню (45°) на 8-10 хв. При наявності аглютинації у всіх краплях кров слід вважати резус-позитивною, при відсутності аглютинації всюди - резус-негативною. Контроль сироваток проводять стандартними Rh+ rh - еритроцитами по тій же техніці.
Визначення резус-фактора з застосуванням желатини виробляють ст. пробірках висотою 10 см, діаметром 10-12 мм. Необхідні сироватки двох серій, 10% розчин підігрітої до розрідження желатини і досліджувана кров (2-3 мл), взята без стабілізатора.
Беруть два ряди пробірок за кількістю досліджень, в кожну попарно вводять по 0,01 мл густої суспензії досліджуваних еритроцитів, узятих без стабілізатора. Додають по 1 краплі сироватки першої та другої серії і по 1 краплі желатини. Штатив струшують і поміщають у водяну баню (t° 48°) на 3 хв, після чого в кожну пробірку доливають фізіологічний розчин майже до верху, пробірку два рази перевертають і розглядають на світло неозброєним оком або за допомогою лупи. При аглютинації видно великі або дрібні пластівці на тлі просвітленої рідини (резус-позитивна кров). При відсутності аглютинації рідину в пробірці однорідний, рівномірно забарвлена (резус-негативна кров). У цьому випадку також ставлять контроль зі стандартними Rh+ rh - еритроцитами.
Несумісність по резус-фактору при переливанні крові навіть у малих дозах може викликати продукцію антитіл у реципієнта. При повторних трансфузиях без урахування резус-фактора у реципієнта розвивається внутрішньосудинний гемоліз еритроцитів донора.
Особливістю резус-реакцій є їх повільний розвиток і пізній прояв (через 1-2 години після переливання). Як реакції, так і більш важкі грізні ускладнення виражаються тією ж клінічною картиною, що і при трансфузії крові, несумісної за групою (див. Переливання крові), і вимагають тих же лікувальних заходів. У важких випадках необхідно негайно з'ясувати причини виниклого ускладнення при встановленні різнойменної резус-приналежності провести замісну трансфузію резус-негативної крові (кровопускання в обсязі 600 - 800 мл і введення дещо більшої кількості крові). В іншому - ті ж заходи, що і при ускладненнях від переливання крові, несумісної за групою.
Профілактика може бути повністю забезпечена лише при застосуванні однойменної по резус-фактору крові. Перед кожною трансфузией необхідно проводити пробу на сумісність за резус-фактором сироватки хворого і еритроцитів донора за звичайною методикою (див. Переливання крові), але при температурі 45°. Наявність аглютинації вказує на несумісність.
