Реакція Райта

Реакція Райта (А. О. Wright) - серологічний метод лабораторної діагностики бруцеллезной інфекції.
Реакція Райта високо специфічна і стає позитивною з самого початку хвороби. Найбільш високі титри реакції Райта (80% і вище) зазвичай спостерігаються через 1-2 міс. після початку захворювання і зберігаються протягом гарячкового періоду. Надалі титри реакції починають падати, і до кінця першого року захворювання реакція Райта, як правило, стає негативною. Поява і накопичення аглютинінів у крові хворих на бруцельоз залежать від ступеня антигенного подразнення. Тому найбільш високі показники титрів аглютинінів спостерігаються у фазі бактеріємії, різко знижуючись у міру загасання інфекційного процесу.
Іноді реакція Райта зберігається позитивною до 2-3 і навіть 5 років після перенесеного захворювання. Однак у цих випадках слід мати на увазі можливість повторного інфікування і рецидивів захворювання. У деяких випадках класичного бруцельозу (див.), підтвердженого виділенням гемокультури і позитивної алергічною пробою, реакція Райта може бути від'ємною; це можливо при зараженні організму зміненим в антигенному відношенні штамом бруцел. Завдяки деякої спільності в антигенній структурі слабоположительные результати реакції Райта можуть бути у людей, інфікованих збудниками туляремії, холери, і при деяких інших інфекційних захворюваннях, а також у осіб, вакцинованих проти цих інфекцій. Слабоположітельная реакція Райта (в розведеннях 1:50, 1:100) іноді спостерігається і у здорових жінок в останні тижні вагітності. Повторна постановка реакції Райта (спостереження за її динамікою) дозволяє диференціювати специфічну реакцію Райта від неспецифічної, так як підвищення титрів вказує на наявність бруцеллезной інфекції.
Істотну роль у реакції Райта грає підбір штамів для приготування діагностикумів (диссоційовані штами для цієї мети не придатні), а також концентрація застосовуваної мікробної суспензії. Крім антигену, джерелом помилок може бути і досліджувана сироватка. Вона повинна бути свіжою, негемолизированной, прозорою (без еритроцитів тощо) і без ознак проростання сторонньою мікрофлорою.
При постановці реакції Райта іноді спостерігаються так звані проагглютинационные зони, тобто негативний результат з малими розведеннями сироватки і чітко виражений позитивний результат при більш високих розведеннях; можливо також випадання аглютинації в середній частині ряду розведень. Явище це частіше спостерігається при високих титрах сироваток і робить необхідним застосування довгого ряду розведень. Поява феномена зони, мабуть, пов'язано з наявністю в сироватках крові неповних (блокують) антитіл. Сироватку крові для дослідження отримують звичайним способом.
Реакцію Райта ставлять завжди з двома контролями: а) контроль кожної з досліджуваних сироваток для виключення помилкової аглютинації за рахунок випадання білків самої сироватки і б) контроль антигену - одна пробірка при будь-якій кількості досліджуваних сироваток - для виключення спонтанної аглютинації антигену. Физиол. розчин, який застосовується для розведення сироватки і антигену, повинен виготовлятися на дистильованій воді нейтральної реакції (рН=6,9-7,1) і щоб уникнути проростання містити 0,5% карболової кислоти. Реакцію Райта ставлять не менш ніж у п'яти розведеннях(1:50, 1:100, 1:200, 1:400 і 1:800) в об'ємі 1 мл кожна. В якості антигену застосовують діагностикум, подтитрованный з національної стандартної противобруцеллезной агглютинирующей сироватці. Перед вживанням діагностикум розводять в 10 разів карболизированным (0,5%) фізіологічним розчином. В 1 мл розведеного діагностикумів міститься близько 6-109 мікробних клітин.
Облік реакції проводять через 24 години шляхом порівняння ступеня просвітлення в дослідних пробірках з відповідним стандартом каламутності, який готують наступним чином. В 4 пробірки послідовно наливають 1, 2, 3 і 4 мл розведеного діагностикумів, потім в тому ж порядку додають 3, 2 і 1 мл карболизированного фізіологічного розчину, в останню пробірку нічого не додають. Після збовтування вміст беруть по 0,5 мл антигену кожної концентрації і 0,5 мл карболизированного фізіологічного розчину. Таким чином отримують 4 пробірки стандарту мутності з різним ступенем просвітлення (75% - 3-, 50% - 2 - і 25% - 1 - й відсутність просвітлення), які разом з досвідченими пробірками поміщають у термостат при t° 37° на 24 години, після чого проводять облік реакції. Для єдиної системи обліку в даний час рекомендують вираз титрів сироваток у міжнародних одиницях антитіл (ME). Діагностичним титром досліджуваної сироватки вважається 50% аглютинації (2+).
Перерахування титру сироватки на міжнародні одиниці роблять наступним чином. Стандартизований діагностикум зі стандартною противобруцеллезной агглютинирующей сироваткою, що містить 1000 ME антитіл в 1 мл, дає 50% аглютинації в розведенні цієї сироватки 1 : 500. Отже, титри досліджуваної сироватки 1 : 50, 1 : 100, 1 : 200 і т. д. з застосуванням стандартизованого діагностикумів вказують на те, що в 1 мл досліджуваної сироватки міститься 100, 200, 400 і т. д. міжнародних одиниць антитіл. Таким чином, перерахування титру досліджуваної сироватки на міжнародні одиниці виробляють шляхом її подвоєння. При діагностичній оцінці результатів реакції аглютинації рекомендується наступна схема: титр сироватки 1 : 50 (100 МО) - результат сумнівний, 1 : 100 (200 ME)- слабо позитивний, 1 : 200 (400 ME) - позитивний, 1 : 200 і вище (800 ME)- різко позитивний.