Проведення электрофоретического поділу є лише першим етапом аналізу досліджуваної суміші. Далі проводиться прояв білкових зон шляхом їх фарбування з наступним кількісним вимірюванням вмісту кожної фракції. Це може бути здійснено або шляхом елюції барвника з розрізаної у відповідності з виявленими зонами папери та вимірювання оптичної щільності отриманих елюатів з допомогою спектрофотометра, або фотоколориметра, або шляхом прямого денситометрирования паперу або іншого носія, за допомогою спеціальних денситометров з автоматичним записом кривих оптичної щільності і їх інтегруванням. Вітчизняною промисловістю випускається денситометр БІАН-170. Денситометр БІАН-170 складається з перетворювача з вимірювачем і кимографа БІАН-110. Прилад має дві швидкості руху электрофореграммы - 30 і 60 мм/хв. В денситометрах, що випускалися до 1975 р., була ще швидкість 15 мм/хв.
БІАН-170 може проводити вимірювання як у прохідному, так і у відбитому світлі синьої, зеленої та червоної областях спектру. Одночасне варіювання швидкостей руху электрофореграммы та паперової стрічки на чернильнопишущем кимографе дозволяє отримувати різні масштаби запису. Денситометр забезпечений цифровим інтегратором, автоматично визначає площу під заданим ділянкою кривої. Габарити денситометрического перетворювача - 470X275X315 мм, маса-17 кг, інтегратора-225X280X220 мм, маса -5 кг, вимірника-425x205x280 мм, маса -23 кг і кимографа - 370x205x100 мм, маса - 7 кг. Зовнішній вигляд денситометра БІАН-170 наведено на рис. 103.
Рис. 103. Денситометр БІАН-170 с кимографом БІАН-110.
З імпортних приладів в СРСР найбільш поширені і добре себе зарекомендували денситометры фірми «Карл Цейсс» (НДР). Ці прилади серії ERI [72] дозволяють отримувати кількісну оцінку электрофореграмм на папері, агарі і ацетате целюлози, забезпечені інтегратором і можуть проводити вимірювання як у прохідному, так і у відбитому світлі.
Метод аналітичного електрофорезу на папері знайшов широке застосування для дослідження сумішей білків і протеидов не тільки в науково-дослідній, але й в клінічній практиці при дослідженні сироватки крові [12]. Кращі результати отримані при проведенні електрофорезу сироватки в 0,1 М вероналмединаловом буфері при рН-8,6. При рутинному веденні аналізу легко визначається 5 фракцій - альбумін, α, α2, β і ү-глобуліни, а окремими методичними прийомами вдається отримувати на папері до 9 фракцій [10]. Проведення на папері энзимэлектрофореза [21], що полягає у виявленні на папері смуг зі специфічною ферментативною активністю, дозволило використовувати цей метод при дослідженні та клінічному виявленні ензимопатій.
Описана апаратура, придатна для роботи з невеликими величинами напруженостей електричного поля і добре зарекомендувала себе при дослідженні білків, виявилася непридатною для розділення сумішей низькомолекулярних речовин, наприклад продуктів гідролізу білків - амінокислот і пептидів. Зважаючи на високих швидкостей поступальної дифузії низькомолекулярних речовин для досягнення задовільної
розділення необхідно було істотно збільшити їх электрофоретическую рухливість, для чого довелося підвищити напруженості електричного поля з 2-5 до 20-50 В/см, тобто перейти до високовольтного електрофорезу. На електрофоретичні камери довелося подавати напруги постійного струму до 1500 В і вище. При цьому нагрів папери зріс настільки, що працювати без хорошої системи охолодження стало практично неможливо. Найбільш вдалим виявилося приміщення паперу поверх одного або між двома блоками з подвійними стінками, охолоджуваними проточною водою з водопроводу (взимку) або проміжного холодильного термостата. Високовольтний електрофорез знайшов найбільше застосування в так званому методі «відбитків пальців», тобто визначенні пептидного складу білкових гідролізатів шляхом проведення поділу досліджуваного гідролізату за допомогою електрофорезу в одному напрямку і хроматографії - в перпендикулярному. При цьому аналіз проводиться на великих аркушах паперу розміром 30x40 см або ще більше. Зрозуміло, що охолоджуючі блоки повинні мати аналогічні розміри. Блоки з металу (нержавіючої сталі або дюралюмінію) володіють більшою теплопровідністю, забезпечують ефективне охолодження і не вимагають додаткових прокладок для електричної ізоляції папери від охолоджуючого блоку.
Вітчизняної промисловістю намічений випуск приладу для високовольтного електрофорезу, призначеного для аналізу низькомолекулярних сполук при зниженій температурі (від -5° до +10° С) марки ПВЭ-1.
