Методи об'єктивної оцінки стану згортаючий системи крові набувають все більш широке поширення. Сьогодні існують інструментальні методи дослідження гемостазу можна розділити на дві основні групи: 1) механічні і механо-електричні і 2) кондуктометричні.
До першої групи відносяться тромбоэластографы - прилади, засновані на методі тромбоэластографии, вперше запропонованому Хартертом і згодом описаний ним у ряді робіт [38, 39].
До групи кондуктометричних приладів відноситься коагулограф Н-333.
З появою перших тромбоэластографов виникла можливість значною мірою вилучити суб'єктивні помилки, властиві більшості широко поширених методів, що характеризують стан системи згортання крові (час згортання за Лі-Уайтом, протромбиновая активність, толерантність плазми до гепарину та ін). Сучасні тромбоэластографы дозволяють графічно реєструвати процес згортання крові аж до фібринолізу, досліджувати порушення фібринової структури при захворюваннях, що супроводжуються порушенням згортання і протизвертальної системи крові, здійснювати контроль при лікуванні хворих антикоагулянтними препаратами.
Метод тромбоэластографии заснований на графічній реєстрації змін фібрин-тромбоцитарної структури проби крові або плазми, які розміщені в кювету приладу. Кювету, в якій знаходиться кров (або плазма), термостатирована і здійснює обертальні зворотно-поступальні рухи. В кювету, не торкаючись її, опущений циліндр, закріплений на тонкої сталевої нитки. У тромбоэластографе, за Хартерту, на нитки укріплено дзеркало, на яке падає промінь світла, що відхиляється на відстань, що відповідає куту повороту циліндра.
На тромбоеластограмми (рис. 120) розрізняють першу фазу згортання - утворення тромбопластину, обозначаемую як час реакції або R. Час реакції відображає ферментативну фазу згортання до появи перших ознак опору кров'яного згустку. Час реакції на тромбоеластограмми вимірюється відрізком від початку запису до її розширення до I мм. До отриманого значення додають час наповнення кювети (n).
Рис. 120. Схема розшифровки тромбоэластограммы. Пояснення в тексті.
Друга фаза - утворення тромбіну, відповідає швидкості, з якою йде утворення ниток фібрину (організація згустку); її позначають символом, на тромбоеластограмми вона визначається відстанню від розширення кривої в 1 мм до її розширення до 20 мм.
Третя фаза, обумовлена максимальної еластичністю (щільністю) згустку (Ма), характеризується найбільшою амплітудою запису.
За формулою E= 100·ma/100-ma розраховують величину Е, яка характеризує функціональну здатність тромбоцитів, кількість і якість фібриногену. Кількість фібриногену в сироватці впливає на максимальну еластичність, тому при зменшенні її одночасно з подовженням часу реакції R знижується і максимальна еластичність.
При проведенні досліджень з допомогою тромбоэластографа необхідно враховувати час, що минув з моменту взяття крові до початку запису, яке повинне бути завжди однаковим для отримання порівнянних результатів.
Чотириканальний тромбоэластограф Тромб-1 (30] має 4 автономних каналу запису і дозволяє отримувати об'єктивну інформацію про перебіг процесу згортання цільної крові або цитратної плазми [15, 17].
Технічні характеристики приладу Тромб-1: об'єм крові або плазми, необхідний для дослідження,- 0,36 мл Запис тромбоэластограммы проводиться чорнильно-пишучим самописцем на діаграмного паперу шириною 100 мм, зі швидкістю руху стрічки 10 мм/год, Температура проб крові підтримується безконтактним напівпровідниковим терморегулятором на рівні 37±1° і контролюється по ртутному термометру. На приладі можна одночасно записувати результати дослідження 1,2 і 4 проб крові або плазми або 2 проб з паралельним записом.
Прилад живиться від мережі змінного струму напругою 220 в Споживана потужність - 120 Вт. Габаритні розміри - 540 X 295 X 350 мм. Маса - 20 кг
В даний час випускається більш досконалий тромбоэластограф Тромб-2 (рис. 121). Він дозволяє одночасно записувати від однієї до чотирьох проб крові або плазми, причому обсяг досліджуваних проб при записі на 1 і 3 каналах становить 0,36 мл, а на 2 і 4 каналах 0,1 мл, що дозволяє використовувати кров, отриману проколом м'якоті пальця. Початковий ділянку тромбоэластограммы може бути зареєстрований з триразовим збільшенням, що підвищує точність визначення початку процесу згортання.
Рис. 121. Тромбоэластограф Тромб-2.
На кондуктометрическом принципі побудований коагулограф Н-333, позитивно зарекомендував себе при дослідженні системи згортання крові, а також ряду інших показників [24, 26, 29].
Прилад автоматично реєструє початок і кінець процесу згортання крові, швидкість зсідання, щільність згустку, початок ретракції і фібринолізу, швидкість його.
Л. Ф. Коблов і співавтори [16] підкреслюють, що ретракція кров'яного згустку, будучи заключною фазою згортання, залежить від ряду факторів, у тому числі, в значній мірі, від кількості та функціональної активності тромбоцитів, вказуючи на можливість застосування коагулографа саме для цих цілей. Коагулограф може бути також використаний для дослідження швидкості реакції осідання еритроцитів в динаміці, визначення кількості фібриногену, величини гематокриту[4, 5, 6, 25, 28, 29].
Для дослідження може бути використана кров венозна та капілярна, отримана проколом м'якоті пальця.
Принцип дії приладу заснований на реєстрації зміни електропровідності крові. Досліджуваний зразок крові (0,28 мл) поміщається в комірку приладу, виготовлену з фторопласту (несмачиваемая пластмаса). Осередок розрахована так, що забезпечує точну дозу без необхідності застосування мірної піпетки. Після заповнення осередок поміщається в повітряний термостат коагулографа, у якому автоматично підтримується температура 37±0,5°. Спеціальне переганяє пристрій, що приводиться в рух електродвигуном, надає комірці коливальні рухи, так що кров поперемінно замикає й розмикає електроди, запресовані в дні комірки. Поступово, у міру згортання, переміщення крові по дну комірки може, вона стікає з електродів повільніше і тому вони розмикаються менш повно. Коли процес згортання крові закінчиться, припиниться розмикання електродів.
Товщина шару над електродами при гойданні комірки буде змінюватися в залежності від щільності згустку, і це призведе до зміни електропровідності.
При ретракції згустку і фібринолізі виділяється сироватка почне переміщатися по комірці, і це також призведе до зміни опору. Результати цих процесів записуються на діаграмної стрічки самописця, як послідовні імпульси з частотою 6 хитань на хвилину, а амплітуда хитань відповідає електропровідності крові, що замикає електроди комірки. До тих пір, поки кров не згорнулася, на діаграмної стрічки реєструється велика амплітуда імпульсів. У міру згортання крові амплітуда імпульсів зменшується. Коагулограма здорової людини наведена на рис. 122.
Рис. 122. Коагулограма здорової людини (тривалість одного імпульсу-10 с). Швидкість руху стрічки-10 мм/хв.
Т - початок згортання крові; Т2 - кінець зсідання крові: Т3 - тривалість процесу згортання; Арф - час початку реєстрації фібринолізу; Ам - максимальна амплітуда (відповідає значенню гематокриту); Ат - мінімальна амплітуда.
Рис. 123. Коагулограф Н-333.
Портативність коагулографа (зовнішній вигляд приладу наведено на рис. 123), автоматична реєстрація процесу, простота експлуатації дозволяють використовувати прилад в широкій мережі лікарень і поліклінік, а також науково-дослідних інститутів.
Технічні характеристики коагулографа Н-333: габарити приладу - 135x250x171 мм; маса - 6 кг Живлення від мережі змінного струму - 220 В, 50 Гц, споживана потужність - не більше 20 Вт.
Оцінка згортаючих властивостей крові може бути здійснена і без реєстрації тромбоэластограммы з допомогою тромбоэластометра ТЕМ-1 (рис. 124).
Рис. 124. Тромбоэластометр «ТЕМ-1».
Тромбоэластометр реєструє два найбільш важливі параметри процесу згортання крові: час реакції і площа тромбоэластограммы, подсчитываемую протягом 15 хв після закінчення часу реакції. Остаточний результат дослідження автоматично реєструється на двох лічильниках [18].
Для визначення протромбінового та тромбопластин о в о г о часу зручний шведський прилад CU-500 [48]. В основу принципу визначення часу утворення згустку покладено метод Квика, але процес визначення автоматизований, що підвищує точність методу, за рахунок виключення суб'єктивних помилок.
CU-500 являє собою фотоелектричний прилад з вбудованим суховоздушным термостатом з температурою 37±0,5°, що вміщає 12 реакційних осередків. Після інкубації в термостаті при додаванні хлориду кальцію відбувається синхронне автоматичне включення фотоелектричної системи вимірювання оптичної щільності і електронного секундоміра. На певному рівні оптичної щільності електронний секундомір вимикається, і результати фіксуються на цифровому табло, з точністю до десятих часток секунди.
До приладу додається набір високочистих реактивів і автоматична піпетка зі змінними наконечниками з несмачіваемого матеріалу одноразового користування. Реактиви і плазма відмірюють автоматичною піпеткою. Протромбіновий час вимірюється з точністю ± 0,5 с. Тромбопластиновий час - з точністю ±0,2 с. Прилад підключається до мережі змінного струму напругою 127/220 В, 50 Гц. Споживана потужність - 20 Вт. Маса -4,1 кг Габарити - 330Х185Х147 мм.
