Останнім часом ВКВ аналітичного приладобудування АН СРСР у Ленінграді розроблено досить повний і зручний комплект обладнання для тонкошарової хроматографії КТХ-01 [20]. В залежності від призначення комплект може поставлятися повним (KTH-01-01), середнім (KTH-01-02) і малим (KTH-01-03). Особливо цінними в наборі є обладнання для нанесення шару речовин на скляні пластинки з регульованою товщиною від 0,05 до 2 мм і автоматичні дозатори для нанесення на пластинки проб, що дозволяють наносити 0,1 - 100 мкл досліджуваного розчину зі швидкостями 4, 8, 12, 32, 36 і 72 мкл/ч. Можливе нанесення проб у звичайній і інертній атмосфері. Крім того, набір включає в себе спеціальний пристрій для проведення градієнтної елюції хроматограмм при подачі елюентів зі швидкостями 0,23; 0,56; 2,3 і 5,2 мл/хв. Для попередньої активації пластинок, покритих шаром целюлози, їх сушіння і прояви деяких типів забарвлення передбачені термостатированные камери на температури в межах від 35 до 225° с З точністю термостат1фования ±2° С.
У відсутність описаного комплекту можна з успіхом застосовувати тонкошарову хроматографію, користуючись простими саморобними пристроями, аналогічними входять в комплект або описаним при викладі методу хроматографії на папері. Ряд закордонних фірм, у тому числі широко відома фірма хімреактивів «Мерк» (ФРН), випускає вже готові для проведення тонкошарової хроматографії пластинки, вкриті целюлозою М N 30, силікагелем або деякими іонообмінними смолами.
Методи хроматографії на папері і особливо в тонкому шарі є високочутливими швидкими аналітичними методами. При збільшенні товщини шару до 2 і навіть 4 мм метод тонкошарової хроматографії може постати в мікро - і полумикропрепаративном варіанті.
Препаративное поділ речовин або виділення окремих компонентів сумішей здійснюється виключно методами колонковою хроматографією.
Процедура рідинної хроматографії [37] на колонці складається з наступних основних елементів:
1) підготовка колонки, що включає її заповнення відповідної хроматографічної середовищем;
2) нанесення проби та проведення елюції;
3) аналіз одержуваного елюату;
4) препаративний збір отриманих фракцій.
У цій послідовності ми спробуємо викласти основні вимоги, що пред'являються до апаратури, що служить для виконання зазначених етапів хроматографічного розділення [13, 68, 72].
Вибір апаратури починається з вибору основного інструменту поділу - колонки. Вибір розмірів колонки і швидкості елюції не є однозначним. Практично в звичайних лабораторних установках при використанні працюють при не дуже великих тисках скляних колонок і часи поділу, характеризуються годинами, достатню роздільну здатність можна отримувати при відносинах довжини колонки до її діаметру в межах 10-30. У рідинних промислових хроматографах типу, наприклад автоанализаторов амінокислот, це відношення іноді сягає ста і більше, а в газорідинних хроматографах - тисячі і багатьох тисяч. Необхідно враховувати, що швидкість елюції при проведенні сорбційної та іонообмінної хроматографії повинна узгоджуватися з часом встановлення рівноваги, яке залежить від ряду факторів - природи поділюваних речовин, типу і форми смоли, температури і ін
Конструкція стовпчика повинна передбачати наявність в її нижній частині пористої перегородки для підтримки наповнювача. Допустимо застосування фільтрів з пористого скла, але краще - з пористого поліетилену. Зручно розташовувати такий фільтр на вставленому в колонку поршні, забезпеченому одночасно вузьким отвором для проведення елюції. Наявність двох таких поршнів з перегородками в нижній і верхній частинах колонки, між якими розташовується наповнювач, що дозволяє при бажанні легко регулювати робочу довжину колонки, звести до мінімуму мертві обсяги в ній і здійснювати элюцию знизу вгору по довжині колонки, що в ряді випадків забезпечує найкращий розподіл і необхідно при проведенні рециркуляційної (тобто багаторазового) хроматографії або застосуванні сильно ущільнюючий наповнювач, що володіє малою механічною міцністю. Термостатування колонки дозволяє отримувати більш відтворювані результати. У ряді випадків хроматографії застосовується программированное зміна температури колонки.
Деякі зарубіжні фірми виготовляють хроматографічні колонки різних розмірів-від невеликих лабораторних аж до напівпромислових зразків. На рис. 110 представлений зразок хроматографічної колонки, що випускається фірмою ЛКБ (Швеція).
Рис. 110. Хроматографічна колонка.
Фірма випускає забезпечені термостатирующей сорочкою лабораторні колонки 20 розмірів діаметрів від 6 до 25 мм і довжиною від 15 до 100 см, розраховані на тиск від 10 до 80-105 Па [45].
Для проведення елюції, а також регенерації і промивання колонки в неї необхідно подавати элюирующий або промивної розчин з певною і постійною швидкістю. Для цього цілком достатньо гідростатичний тиск 2 м. Однак зручніше застосування циркуляційних насосів.
