Лабораторні методи діагностики

Сторінки: 1 2 3 4

Радіоаллергосорбентний тест (PACT). В останні роки було розроблено метод виявлення специфічних антитіл різних класів в сироватках хворих алергічними захворюваннями. У 1967 р. Wide, Bcnnich і Johanssen знайшли метод виявлення специфічних антитіл класу IgE до неінфекційних алергенів. Виявилося, що концентрація IgE в сироватці у хворих з полінозом, бронхіальною астмою вище, ніж в осіб контрольної групи. На цьому грунтується припущення, що даний імуноглобулін близький до антитілам-реагинам, і для їх ідентифікації (антитіл) був запропонований досить чутливий PACT.
За допомогою цього методу проводиться кількісне визначення аллергоспецифических IgE в крові. Принцип методу полягає в тому, що випробуваний алерген ковалентно приєднується до паперового диска. При додаванні сироватки хворого відбувається зв'язування алергену з антитілом, якщо в сироватці є відповідні даного алергену IgE. Після відмивання неспецифічних IgE додаються антитіла проти IgE, мічені радіоактивним йодом. Відбувається утворення комплексу: алерген на папері специфічний IgE + антитіла IgE. Несвязавшиеся антитіла IgE видаляються. Радіоактивність цього комплексу легко визначається. Чим більша радіоактивність, тим більше специфічних IgE у сироватці пацієнта. Радіоактивність дослідної проби порівнюють з показаннями для референс-сироваток, і на цій підставі роблять оцінку отриманих результатів. Цінність методу полягає і в тому, що для постановки тесту з одним алергеном необхідно всього 0,05 мл сироватки хворого, що дає можливість ставити тест відразу з декількома алергенами.
PACT дозволяє визначати специфічні імуноглобуліни не тільки в сироватці, але, що особливо цінно, в слині, шлунковому вмісті, кале і т. д. На думку ряду дослідників, визначення специфічних імуноглобулінів в секретах є більш інформативним, ніж у сироватці крові.
В даний час, незважаючи на впровадження таких сучасних методів лабораторної діагностики, як PACT, не втратили свого значення і більш прості методи, засновані на реакціях клітин крові.
У літературі, присвяченій загальним питанням теорії алергії і патогенезу алергічного процесу, велике місце приділяється ролі клітинних елементів крові у здійсненні алергічних реакцій.
Клітини крові можуть бути носіями антитіл (лімфоцити), можуть фіксувати на собі комплекс антиген - антитіло (тромбоцити, еритроцити, зернисті лейкоцити, базофіли). На цих властивостях клітин крові засновані деякі методи лабораторної діагностики.
Тест дегрануляції базофільних лейкоцитів. Цілим рядом робіт переконливо показано, що базофіли крові і тканинні огрядні клітини, беручи участь в алергічних реакціях, переважно негайного (химергического) типу, піддаються альтерації, дегрануляції і навіть лізису, що супроводжується виділенням біологічно активних речовин. У 1962 р. був запропонований діагностичний тест, заснований на зміні форми базофілів у присутності комплексу антиген - антитіло. З тих пір ця реакція називається «тест Шеллі», по імені запропонував її автора.
Існує 2 варіанти реакції: пряма і непряма. Пряма реакція ставиться на базофільних лейкоцитах хворого алергією. Однак цей метод потребує великої кількості крові хворого, так як відомо, що кількість базофілів у крові людини невеликий (0,3-0,4 %), тому попередньо проводиться лейкоконцентрация. У дитячій практиці діагностика харчової алергії проводиться за допомогою непрямого тесту Шеллі.