Проводиться з бактеріальними алергенами, іноді з лікарськими, побутовими, пилковими.
Реактиви та обладнання: спирт 96°, 40% розчин формаліну иейтралный, гематоксилін, йодна кислота (750 мг йодної кислоти розчинити в 150 мл дистильованої води), реактив Шиффа (1 г основного фуксину розчинити в 200 мл гарячої води, кип'ятити 5 хвилин, додати 20 мл соляної кислоти і 1 г метабисульфита, профільтрувати), 0,1% метиловий зелений. Алергени використовуються в розведенні з 25% розчином цитрату натрію 4:1. Для діагностики використовуються бактеріальні алергени виробництва Казанського НИИЭМ з етикеткою на ампулах «Для постановки тесту «ППП», термостат, стерильний посуд (пробірки, піпетки), мікроскоп.
Техніка. Для кожного дослідження використовуються дві хімічно чистих і стерильних пробірки - дослідна і контрольна. Якщо одномоментно проводиться дослідження з декількома алергенами, для кожного з них беруть окрему пробірку, а контрольна залишається спільною. Алергени в суміші з розчином цитрату натрію вносять по 0,02 мл в дослідні пробірки, а в контрольну пробірку - 0,02 мл 5% стерильного розчину цитрату натрію В кожну дослідну і контрольну пробірки додається за допомогою мікропіпетки по 0,08 мл крові, взятої з пальця хворого. Нерізкими погойдуваннями кров перемішують з антикоагулянтом, пробірки закривають м'якими пробками і поміщають на 2 години в термостат при 38° С. Потім готують мазки на знежирених предметних стеклах, їх маркують і після підсушування на повітрі фіксують протягом 10-15 хвилин сумішшю 96° спирту і 40% розчину формаліну (10: 1). Після фіксації мазки відмивають в трьох порціях 96° спирту за 10 хвилин у кожній і після просушування фарбують йодною кислотою (в темній склянці 8 хвилин), промивають у 3-х порціях дистильованої води за 3 хвилини в кожній, сушать на фільтрувальному папері, обробляють реактивом Шиффа 18 хвилин, потім в 2-х склянках сірчистої води по 2 хвилини, опускають у посудину з проточною водопровідною водою на 30 хвилин. Потім поміщають у склянку з фарбою (0,1% метиловий зелений) на 1-2 хвилини і прополіскують в склянці з дистильованою водою. Витирають марлею з боку скла, сушать на фільтрувальному папері.
Оцінка результатів. Під імерсійної системою мікроскопа в кожному мазку (досвідчених і контрольному) сосчітивать по 100 нейтрофілів, враховуються пошкоджені, зруйновані, мають амебоидную активність клітини. Результат виражають індексом, який знаходять за формулою
ППП=[А-Нк]/100,
де А - число пошкоджених клітин у дослідній мазку, Нк - аналогічне число в контрольному препараті, 100 - кількість поєднаних лейкоцитів у кожному мазку. Тест вважається позитивним, якщо значення ППН перевищує 0,1.
