РБТЛ може проводитися з бактеріальними, лікарськими, побутовими, пилковими алергенами і з неспецифічним стимулятором фітогемагглютініном (ФГА).
Реактиви та обладнання: ФГА (угорський препарат з вихідною концентрацією 4 мг/мл, робоче розведення 0,1 мл ФГА + 1,9 мл середовища 199), середовище 199 з додаванням 100 ОД пеніциліну і 50 ОД стрептоміцину на 1 мл середовища, гепарин, барвник аэурэозин Романовського - Гімза, термостат, стерильний бокс, мікроскоп, камера Горяєва, предметні скельця, стерильний посуд (пробірки, пастерівські піпетки, піпетки на 1,0 і 5,0 мл, пенициллиновые флакони і гумові пробки), шприци 1, 10, 20-грамові.
Техніка. У стерильну пробірку; змочену гепарином (0,1 мл на 5 мл крові), вносять венозну кров, перемішують і залишають при кімнатній температурі на 40-50 хвилин. Після осідання еритроцитів пастерівської піпеткою відсмоктують плазму, що містить лейкоцити, в стерильну пробірку. Відбирають 1 мл плазми для постановки реакції. Підраховують число клітин в лічильній камері Горяєва (А), що залишилася плазму звільняють від лейкоцитів центрифугуванням (1000 об/хв) протягом 10 хвилин. Аутоплазму використовують в подальшій роботі для приготування живильного середовища для культивування клітин), розводячи середовищем 199. Оптимальна концентрація клітин для постановки РБТЛ - 1:106 в 1 л. Для досягнення цієї концентрації 1 мл плазми з відомою кількістю лейкоцитів (А) розводять до певного об'єму (х) живильним середовищем х = А : 106 (1 л) - кінцевий об'єм суміші, в 1 л якого міститься 1 X 106 клітин. Розведену в потрібній концентрації клітинну суспензію розливають в стерильні пенициллиновые флакони по з мл, додають по 0,1 мл ФГА (в робочому розведенні), щільно флакони закривають гумовою пробкою і культивують клітини в термостаті при 37° С протягом 3 діб. Через трос доби флакони виймають і зливають надосадову рідину, осад на дні флакона ретельно змішують з рештою декількома краплями середовища, продуваючи повітря через пастерівську піпетку. Наносять краплю суспензії на предметне скло, підсушують на повітрі, фіксують в метанолі 3 хвилини і фарбують по методу Романовського - Гімза протягом 15 хвилин.
Оцінка результатів. Проглядається 300-400 клітин, при цьому підраховується кількість бластів і бластоподобных перехідних форм лімфоцитів. Підраховується кількість трансформованих клітин у відсотках до загального числа перелічених клітин (у здорових дітей їх кількість становить 60-70%).
Аналогічно проводиться РБТЛ з алергенами: бактеріальними - в концентрації 1 шкірна доза в 0.1 мл, неінфекційними-1000 PNH в 1 мл, лікарськими речовинами - 10 мікрограмів в 1 мл Реакція з ФГА служить в якості контролю. При постановці РБТЛ з алергенами кількість трансформованих та перехідних клітин становить більше 3%.
