Виявлення антигенів системи АВ0(Н) проводиться трьома основними методами: кількісний метод абсорбції аглютинінів простий, дозволяє уникнути впливу різних забруднень предмета-носія, але недостатньо чутливий; серологічні методи абсорбції-елюції і змішаної аглютинації вельми чутливі і в основному застосовуються для встановлення групової приналежності крові в слідах малого розміру. Ці методи засновані на здатності антитіл α і β абсорбуватися відповідними антигенами А і В. В якості недоліку методів абсорбції-елюції і змішаної аглютинації слід зазначити необхідність використання при них діагностичних сироваток високої активності, а також ретельного дотримання всіх етапів дослідження, щоб уникнути появи неспецифічних реакцій, що можуть призвести до експертних помилок.
При використанні методу абсорбції в кількісній модифікації матеріал плями приводять у взаємодію з сироватками α і β, взятими в підібраному заздалегідь титрі. При наявності в плямах антигену відповідні антитіла сироватки з'єднуються з ним і сироватка або втрачає здатність реагувати з відповідними еритроцитами (наприклад, сироватка а не агглютинирует еритроцити групи А), або значно знизить свій титр. Після абсорбції визначають титр сироваток і на підставі зміни титру судять про присутність того чи іншого антитіла або їх обох в плямі крові. Метод вимагає порівняно великої кількості досліджуваної крові.
Реакції абсорбції-елюції і змішаної аглютинації дозволяють послідовно в одному і тому ж матеріалі дослідити антигени декількох еритроцитарних систем. На першому етапі вони проводяться однаково. Беруть дві ниточки завдовжки по 0,5 - 0,6 см і обробляють їх метиловим спиртом для фіксування крові на матеріалі дослідження. Одну ниточку заливають сироваткою α, а другу - сироваткою β (рис. 95).
Рис. 95. Схема реакції абсорбції-елюції.
При наявності в досліджуваному матеріалі відповідного сироватці антигену (наприклад, α і А) відбувається абсорбція цього антитіла і утворюється комплекс антиген - антитіло. Цей комплекс при подальшому відмиванні ниточок від вільних антитіл не видаляється. Якщо потім проводять реакцію абсорбції-елюції, то элюцию (роз'єднання комплексу антиген - антитіло) виробляють шляхом нагрівання в ізотонічному розчині хлориду натрію. Антитіла при цьому надходять у навколишнє середовище. Шляхом додавання до элюату еритроцитів групи А і виявляють элюированное антитіло (аглютинація відповідних еритроцитів). На підставі цього судять про присутність у досліджуваній крові антигенів. Наприклад, досліджувана кров містить антиген А. В цьому випадку сироватка а зв'яжеться з антигеном А й при елюції вийде в елюатів. Присутність антитіл а в елюатів буде встановлено, так як вони викликають аглютинацію стандартних еритроцитів А.
При проведенні реакції " змішаної аглютинації до ниточки після промивання додають стандартні еритроцити груп А і В (до ниточці, обробленої сироваткою а, додають еритроцити групи А, а до ниточці, обробленої сироваткою 6, - еритроцити групи В).
При наявності в плямі крові антигену А сироватка набуде зв'язок з цим антигеном і після додавання до еритроцитів групи А вільні валентності антитіл а фіксують еритроцити А. Аналогічна картина буде спостерігатися з еритроцитами при наявності в плямах крові антигену Ст. При мікроскопірованіі спостерігаються скупчення еритроцитів у вигляді бус або муфт вздовж волокон досліджуваної ниточки. При негативному результаті дослідження еритроцити розподіляються в препараті рівномірно.
Система MNSs має дев'ять груп: MNSs, MNs, Ns, Mss, Ms, MS, NSs, MNS та Ns. Внаслідок сприятливої частоти розподілу серед населення система є досить інформативною для судово-медичної групової ідентифікації. Встановлення групових факторів системи MNSs в плямах крові складно у зв'язку з меншою стійкістю і здатністю до зберігання антигенів М, N, S, s в плямах крові в порівнянні з груповими антигенами системи АВ0(Н), а також з різною антигенною силою виразності її групових чинників М і N. В даний час для виявлення антигенів системи MNSs в слідах крові досить успішно застосовуються методи абсорбції-елюції і змішаної аглютинації з використанням високоактивних діагностичних сироваток.
