Для визначення резус-належності крові використовуються стандартні антирезусні сироватки, що випускаються в ампулах. Комплект сироваток складається з двох серій. Сироватки повинні зберігатися в холодильнику при температурі 4-8°. Термін придатності їх в цих умовах - 4 міс.
Перед використанням антирезусних сироваток необхідно перевірити їх придатність: зовнішній вигляд, цілісність ампули, групову приналежність, специфічність, титр містяться в сироватці антирезусних антитіл і термін придатності.
Використовувані сироватки мають титр антитіл не менш ніж 1:32.
Для визначення резус-приналежності досліджуваної крові необхідна водяна баня з терморегулятором і чиста суха чашка Петрі. Якщо немає спеціальної водяній лазні, то можна використовувати каструлю або стерилізатор місткістю не менше 2 л, куди наливається 1-1,5 л води температури 46-48°. Для контролю за сталістю температури води в бані необхідний звичайний водяний термометр. Чашка Петрі повинна бути абсолютно чистою і сухою, інакше краплі сироваток будуть розтікатися по ній. Тому завчасно чашки Петрі прокаливаются в сушильній шафі при температурі 80-100°.
47. Визначення резус-належності крові на чашці Петрі.
Резус-фактор визначається двома серіями антирезусних сироваток, підібраних відповідно до групової приналежності досліджуваної крові. Кров береться з вени у чисту суху пробірку в кількості 1-3 мл Чашка Петрі маркується олівцем-склографом так, як показано на рис. 47, після чого очною піпеткою на ліву половину чашки наносяться по дві краплі антирезусной сироватки однієї серії, а на праву половину - по дві краплі сироватки другої серії. Потім в обидві сироватки верхнього ряду додається по одній краплі 10% суспензії досліджуваних еритроцитів, набраних з дна пробірки пастерівської піпеткою. До сироватки середнього ряду додається по одній краплі 5-10% сироваткової суспензії стандартних резус-позитивних еритроцитів, а до сироватці нижнього ряду - по одній краплі стандартної суспензії резус-негативних еритроцитів. Шляхом додавання стандартних резус-позитивних і резус-негативних еритроцитів перевіряється активність і специфічність сироваток. Якщо сироватки обох серій активні, то з резус-позитивними еритроцитами вони дадуть аглютинацію. Відсутність аглютинації з резус-негативними еритроцитами підтверджує специфічність стандартних сироваток. Після перемішування крапель шляхом легкого похитування чашки Петрі її поміщають у водяну баню при температурі від 46° на 10 хв. Через 10 хв чашку виймають з бані, обережним погойдуванням чашки перемішують еритроцити з сироваткою і при хорошому освітленні на білому тлі читають результат реакції.
Як вже згадувалося, повинна спостерігатися аглютинація стандартних резус-позитивних еритроцитів (другий ряд) і не повинно бути аглютинації стандартних резус-негативних еритроцитів (третій ряд). Якщо досліджувані еритроцити (перший ряд) дали аглютинацію, значить кров хворий резус-позитивна. Відсутність аглютинації еритроцитів у антирезусной стандартній сироватці говорить про те, що кров хворий резус-негативна.
Якщо при визначенні групи крові хворої або її резус-належності вийшов разноречивый результат (наприклад, є аглютинація з однією серією сироватки і немає з іншого тощо), необхідно заново повторити всю реакцію.
Незважаючи на те, що на етикетці консервованої крові вказана її групова і резус-приналежність, перед тим, як приступити до переливання крові, необхідно знову визначити групу та резус-фактор донорської крові. Переливати треба завжди одногруппную кров. Тільки у виняткових випадках, коли в зв'язку з великою крововтратою хворий необхідно за життєвими показаннями зробити гемотрансфузию, а однойменної групи крові у пологовому будинку немає, допускається переливання крові групи 0 (I) Rh-. У зв'язку з тим, що кров групи 0 (I) Rh - не містить агглютиногенов А і В і позбавлена резус-фактора, люди, що мають таку кров, називаються універсальними донорами. Вважається, що їхню кров можна переливати майже всім людям.
