Вірусологічна діагностика. Введення в лабораторну практику техніки тканинних культур для ізоляції та ідентифікації ентеровірусів, а також розробка деяких серологічних методів зробили можливу етіологічну діагностику кожного окремого випадку захворювання на поліомієліт і виявлення вірусоносійства у здорових. Крім того, для епідеміологічного аналізу можна застосовувати масові обстеження проб крові з визначенням титрів антитіл, що нейтралізують той чи інший вірус. Хоча без клінічного та епідеміологічного підтвердження виділення поліовіруса або виявлення антитіл до нього недостатньо для діагнозу поліомієліту (поліовірус може виявлятися й у здорових людей або у вірусоносіїв, хворих іншою хворобою), вірусологічної діагностики при поєднанні ряду даних відводиться дуже важлива роль. Діагноз П. стає більш ймовірним, якщо в підкріплення до клінічними даними поліовірус виявляється при повторному дослідженні і в міру одужання титр антитіл зростає в 4 рази і більше.
Для вірусологічного обстеження беруть проби фекалій тампоном, введеного у пряму кишку. Матеріал для аналізу може бути взятий тампоном або змивом з носоглотки. Попереднє очищення досліджуваного матеріалу від бактеріальних домішок проводиться шляхом обробки антибіотиками або ефіром. Проби до або після обробки рекомендується зберігати в замороженому стані (нижче - 20°). Тампони (ректальні і глоткові) зберігають зануреними в культуральні середовища з великою концентрацією антибіотиків.
Спинномозкову рідину рекомендується досліджувати без зволікання. Кров можна досліджувати на вірус, якщо є підстави підозрювати участь будь-яких неполиомиелитных ентеровірусів. У секційних випадках досліджують кишковий вміст, кишкову стінку і, якщо смерть настала не пізніше десятого дня хвороби, то і мозкову тканину, особливо спинний і довгастий мозок. У пізніх випадках смерті від поліомієліту поліовірус у мозку може не виявлятися, у той час як у кишечнику він ще присутній. Проби сироватки крові слід брати в ранні терміни захворювання і ще раз через 3-4 тижні для порівняльної оцінки динаміки титрів антитіл. Проби, що дали негативні результати в культурах тканини, можуть виявитися позитивними при зараженні новонароджених білих мишей або бавовняних пацюків, що потребує ідентифікації з вірусами Коксакі групи А. У цьому зв'язку велике значення мають результати патогістологічного вивчення ЦНС, скелетних м'язів і так званого коричневого жиру у хворих тварин, а також серологічні досліди на новонароджених гризунів за типуванню виділеного на гризунах вірусу.
Визначення антигенних типів штамів ентеровірусів, виділених в культурах тканини, проводиться в таких же культурах клітин за допомогою перевірених типоспецифических імунних сироваток в їх оптимальних розведеннях.
Через великої кількості імунологічних типів ентеровірусів доцільно користуватися різними поєднаннями сумішей типових імунних сироваток.
Це дозволяє спочатку визначити тип орієнтовно, а потім досвідом з моновалентными сироватками - більш точно.
Зазвичай ці досліди виконують в реакції нейтралізації вірусу в первинних або перещеплюваних культурах тканин людини або мавп, з урахуванням цитопатологического ефекту або кольорової проби або числа утворюються бляшок (колоній вірусу) в клітинному шарі під агаровым покриттям. З деякими типами ентеровірусів (але не з поліовірусом) можна проводити реакцію придушення гемаглютинації з метою типування виділеного вірусу або антитіл до нього. Реакція преципітації в агарі і реакція зв'язування комплементу (з гретым і нативним культуральними антигенами) застосовуються з парними сироватками в якості допоміжних методів серодіагностики в ранній стадії одужання хворих поліомієлітом одночасно з постановкою реакції нейтралізації в культурі тканини. Може з успіхом застосовуватися також реакція імунофлуоресценції для типування ентеровірусів в культурі тканин.
В районах застосування живої вакцини для ідентифікації знову виділених від хворих або здорових (контактних) людей штамів поліовіруса дуже важливо визначати їх генетичні ознаки, які показують приналежність штаму до «диким» або аттенуированным варіантами. З цією метою всі виділені штами перевіряють у дослідах нейтралізації на антигенний ознака з імунними сироватками, приготованими проти прототипных аттенуйованих штамів відповідних імунологічних типів (I, II, III); крім того, перевіряються rct40 - і d-ознаки, що дозволяють відрізняти «дикі» штами поліовіруса від аттенуйованих по різній здатності розмножуватися при 36° і при 40°, а також під шаром агару з різною кількістю бікарбонату натрію.
См. також Вірусологічні дослідження.
