На основі методу хроматографії в пористому склі (принцип молекулярного сита) в СКБ аналітичного приладобудування (р. Ленінград) розроблений автоматичний рідинний хроматограф ХЖ-1302, призначений для визначення молекулярно-вагового розподілу синтетичних і біологічних полімерів в інтервалі молекулярних ваг 3·10-2-30·10-6. В якості детектора в цьому приладі використаний проточний диференціальний рефрактометр. Один цикл визначення при обсязі досліджуваної проби в 1 мл займає близько 4 ч. Габарити приладу - 1700X1450X620 мм, маса -350 кг [14].
Деякі закордонні фірми випускають також автоматичні рідинні хроматографи з широкою сферою використання. Вони забезпечуються, як правило, набором колонок для проведення різних аналізів і гнучкою системою для проведення елюції, термостатування, наступного фарбування фракцій та їх ідентифікації і кількісного визначення. Такі прилади можуть бути використані в багатьох галузях біохімії, експериментальної фармакології і токсикології для розведення і аналізу сумішей білків, так і низькомолекулярних речовин. В якості прикладу можна навести прилад моделі 034, що випускається фірмою «Хітачі» (Японія) спільно з «Перкін-Елмер» (США) [80]. Він забезпечений в якості детектора триканальним проточним реєструючим фотоколориметром, що вимірює і записує оптичну щільність елюату в інтервалі довжин хвиль 200-700 нм і дозволяє аналізувати будь-які суміші речовин біологічного походження. Це настільний прилад, його зовнішній вигляд представлений на рис. 118.
Рис. 118. Рідинний хроматограф типу 034.
Найбільш швидкий, дуже продуктивний і широко поширений у багатьох областях метод газової хроматографії [31, 49], також є різновидом колонковою хроматографією. Завдяки своїй швидкості, високої чутливості і унікальною роздільною силі, цей метод, незважаючи на відносну складність і дорожнечу використовуваної апаратури, знаходить все більше застосування в медицині і біології [5,29,76].
Принцип хроматографічного розділення, як зазначалося вище, полягає в поділі речовини між двома фазами. У рідинної Хроматографії обидві фази є рідинами, газової - одна з фаз - газ. Колонка газового хроматографа заповнена інертним високопористих добре проникний для газів твердим підтримує матеріалом, поверхня якого покрита тонкою плівкою нелетучей рідини, є стаціонарною фазою. Аналізована суміш в газоподібному стані просувається через колонку в струмі продувається через колонку інертного тазу-носія, є рухомою фазою. Поділ досягається завдяки різним розподілом окремих речовин між стаціонарною і рухомий фазами, внаслідок чого ці речовини в різній мірі відстають від струму газу-носія. Речовини, які абсолютно не сорбуються стаціонарною фазою, будуть рухатися по колонці зі швидкістю газу-носія і не будуть розділятися. Звідси зрозуміло, що вибір стаціонарної фази робить вирішальний вплив на якість розділення. Однієї з різновидів газорідинної хроматографії є капілярна хроматографія, при якій рідка фаза наноситься безпосередньо на внутрішні стінки капілярної трубки завдовжки від десятків до декількох сотень метрів.
В якості твердого носія використовується подрібнений вогнетривка цегла, цілить 545 та інші матеріали. В якості газу-носія найчастіше застосовуються водень, гелій, азот і аргон.
Досліджувані речовини в процесі поділу повинні бути газоподібними, для чого їх піддають випаровуванню при введенні в колонку. Температура випарників досягає 500° С. Максимальні температури колонок для різних приладів коливаються в більшості випадків в межах 250-500° С. Це накладає суттєві обмеження на вибір речовин, які можуть безпосередньо аналізуватися методом газової хроматографії. Ці речовини повинні бути, по-перше, досить летючими, тобто володіти низькими температурами кипіння, що дозволяють їм знаходитися при температурі колонки в пароподібному стані, і, по-друге, досить термостабільність, тобто не розкладатися і не руйнуватися при випаровуванні. Тому в першу чергу метод газової хроматографії в біології був застосований для дослідження летких компонентів тканин і біологічних рідин: жирних кислот і складних ефірів, летких амінів і аміноспиртів, ефірних масел, стероїдів, газів крові і т. п., а також пестицидів, деяких фармацевтичних препаратів і т. д. В подальшому для подолання цих труднощів та отримання можливості аналізу нелетких сполук методом газової хроматографії були розроблені хімічні методи отримання більш летких похідних великого ряду сполук. При цьому за рахунок високої швидкості газовохроматографического поділу аналіз суміші амінокислот, наприклад, може бути проведено лише за 1,5-2 год. з урахуванням часу на їх хімічну модифікацію замість 4-6 год при використанні стандартних описаних вище аналізаторів амінокислот.
