Методи статевої диференціації крові засновані на виявленні в лейкоцитах крові ознак, притаманних певному підлозі. У жінок хромосомний набір характеризується наявністю двох статевих хромосом XX, а в чоловіків - двох різних хромосом - XY. В ядрах лейкоцитів статеві хромосоми чоловіків перебувають у клубку хромосоми, а у жінки одна з статевих хромосом перетворюється в хроматиновое тільце і відтискується до периферії ядра, утворюючи вирости, за формою нагадують барабанну перетинку, ракетку. У крові чоловіків подібні утворення (тільця Барра) зустрічаються значно рідше.
Належність крові чоловікові може бути також встановлена шляхом виявлення в ядрах лейкоцитів хромосоми Y, що встановлюється при люмінесцентному мікроскопірованіі мазків крові, приготованих з досліджуваної плями. Для чоловічої хромосоми Y характерно специфічне світіння (люмінесценція).
Обидва методи дозволяють проводити діагностику підлоги в плямах значній давності освіти - півроку і більше. Для такого дослідження необхідна порівняно велика кількість крові - пляма крові розміром 1,5 X 1,5 см і більше.
В основі диференціації крові дорослої людини і плоду лежать відмінності фізико-хімічних і электрофоретических властивостей міститься в крові гемоглобіну, що виражаються в різній швидкості міграції при електрофоретичному розділенні в гелі агару або крохмалю, а також різною мірою стійкості до дії лугів (плодовий гемоглобін НрЕ більш стійкий до дії лугів). Диференціація крові дорослої людини від крові немовляти можлива лише до року і лише в плямах давністю освіти не вище 2-3 тижнів.
Диференціація крові дорослої людини і новонародженого можлива також шляхом виявлення в дитячій крові особливого білка L1-фетопротеїну, відсутнього в крові дорослих людей. Кров дорослого і дитини можна також розрізняти за активності окремих ферментів крові. Однак цей метод з ряду причин поки що не знайшов застосування в експертній практиці.
Встановлення регіонального походження крові в основному базується на виявленні в ній домішок, властивих органу, який явився джерелом кровотечі: домішки слизу і епітеліальних клітин трахеї і бронхів при кровотечі з верхніх відділів дихальних шляхів, домішки калу і слизу прямої кишки при гемороїдальній кровотечі, елементів слизової оболонки матки при менструальному кровотечі. Встановлення менструального походження крові в слідах можливо шляхом виявлення специфічного для неї ферменту фібринолізин, відсутнього у периферичній крові. Це можливо лише в плямах крові незначною давності освіти.
В даний час робляться спроби використовувати для встановлення регіонального походження крові високу тканинну і органну специфічність деяких ферментів, що різко розрізняються по своїй молекулярній будові в різних органах.
Встановлення давності утворення плям крові засновано на зміні при «старінні» крові властивостей гемоглобіну (послідовне його перетворення з оксигемоглобіну в метгемоглобін, гематин, карбоксигемоглобін, гемохромоген і гематопорфирин). Зазначеним похідних гемоглобіну притаманні характерні спектри поглинання. На підставі цих особливостей і проводиться, з урахуванням конкретних умов знаходження предметів зі слідами крові, орієнтовний встановлення давності утворення плями.
В даний час робляться спроби використовувати для встановлення давності утворення плям крові спостерігається зниження активності ряду ферментів крові в залежності від часу, що пройшов з моменту утворення слідів.
Встановлення кількості рідкої крові, яка утворила пляму, необхідно для доказу смерті від крововтрати, при перевірці припущення вчинення вбивства не на місці виявлення трупа і в ряді інших випадків.
Існує певне співвідношення між кількістю сухого залишку крові в плямі і кількістю рідкої крові, яка утворила це пляма, - 1000 мл рідкої крові відповідає в середньому 211 г сухої крові. Спочатку визначають різниця в масі однакових за площею ділянок плями крові і матеріалу предмета-носія (попередньо висушивши їх до постійної маси), яка і буде відповідати масі сухої крові. Потім проводять перерахунок сухого залишку на рідку кров. Метод дозволяє досить орієнтовно встановлювати кількість крові, яка утворила пляму.
Встановлення вагітності та факту колишніх пологів (аборту) з плям крові засновано на виявленні в крові специфічного гормону, що з'являється в ранні терміни вагітності. Гормон досить стійкий у плямах і дозволяє проводити діагностику вагітності вже на 8-10-й день.
Діагностування вагітності, колишніх пологів і переривання вагітності (аборту) можливо також шляхом визначення в крові вагітних жінок і породіль особливого специфічного ферменту - окситоциназы, що з'являється в крові на 4-8-му тижні вагітності і зникає з крові породіль приблизно через місяць після народження дитини. Окситоциназа може виявлятися в слідах крові 2-3-місячної давнини освіти. Для дослідження потрібна незначна кількість сухої крові - 3-5 мг.
В основі визначення походження крові в плямі від живого особи або трупа лежить факт посмертного викиду в периферичну кров трупа тканинних ферментів, які не зустрічаються в кров'яному руслі людини при його житті. Приблизно через 1-2 год після смерті їх рівень зростає настільки, що вони можуть бути виявлені в плямах крові від трупа давністю до 45 діб. Метод складний і поки ще не знайшов широкого застосування в експертній практиці.
