Мікроскопічне дослідження мокротиння включає вивчення нативних (природних, необроблених) і забарвлених препаратів. Для перших відбирають гнійні, кров'янисті, крошковатые грудочки, переносять їх на предметне скло в такій кількості, щоб при накрывании покривним склом утворився тонкий напівпрозорий препарат. При малому збільшенні мікроскопа можуть бути виявлені спіралі Куршманна у вигляді щільних тяжів слизу різної величини. Вони складаються з центральної щільною блискучою извитой осьової нитки і спіралеподібно огортаючої її мантії (рис. 9), в яку бувають вкраплені лейкоцити. Спіралі Куршманна з'являються у мокротинні при спазмі бронхів. При великому збільшенні в нативному препараті (рис. 11) можна виявити лейкоцити, еритроцити, альвеолярні макрофаги, клітини серцевих вад, циліндричний і плоский епітелій, клітини злоякісних пухлин, друзи актиноміцетів, грибки, кристали Шарко-Лейдена, еозинофіли. Лейкоцити - сірі зернисті круглі клітини. Велика кількість лейкоцитів можна виявити при запальному процесі в органах дихання. Еритроцити - невеликі гомогенні жовтуваті диски, що з'являються у мокротинні при пневмонії, застої у малому колі кровообігу, інфаркті легені і руйнуванні тканини. Альвеолярні макрофаги - клітини розміром в 2-3 рази більше лейкоцитів з рясною великою зернистістю в цитоплазмі. Шляхом фагоцитозу вони очищають легені від потрапляють в них частинок (пилу, розпаду клітин). Захоплюючи еритроцити, альвеолярні макрофаги перетворюються в клітини серцевих вад (рис. 12 і 13) з жовто-бурими зернами гемосидерину, дають реакцію на берлінську лазур. Для цього до комочку мокротиння на предметному склі додають 1 - 2 краплі 5% розчину жовтої кров'яної солі і стільки ж 2% розчину соляної кислоти, змішують, накривають покривним склом. Через кілька хвилин микроскопируют. Зерна гемосидерину забарвлюються в синій колір. Циліндричний епітелій дихальних шляхів розпізнається за клиноподібної або келихоподібної форми клітин, на тупому кінці яких свіжої мокротинні видно війки; його багато при гострому бронхіті і гострому катарі верхніх дихальних шляхів. Плоский епітелій - великі багатокутні клітини з порожнини рота, діагностичного значення не мають. Клітини злоякісних пухлин - великі, різної неправильної форми з великими ядрами (для розпізнавання їх потрібно дуже великий досвід исследующего). Еластичні волокна - тонкі, покручені, двоконтурні безбарвні волоконця однакової товщини на всьому протязі, розгалужуються надвоє на кінцях. Вони часто складаються кільцеподібними пучками. Зустрічаються при розпаді легеневої тканини. Для більш надійного їх виявлення кілька мілілітрів мокротиння кип'ятять з рівною кількістю 10% їдкого лугу до розчинення слизу. Після охолодження рідину центрифугують, додавши до неї 3-5 крапель 1% спиртового розчину еозину. Осад микроскопируют. Еластичні волокна виглядають, як описано вище, але яскраво-рожевого кольору (рис. 15). Друзи актиноміцетів для мікроскопування розчавлюють в краплі гліцерину або лугу. Центральна частина друзи складається зі сплетення тонких ниток міцелію, його оточують променисто розташовані колбовидные освіти (рис. 14). При фарбуванні розчавленої друзи за Грамом міцелій забарвлюється у фіолетовий, колбочки в рожевий колір. Грибок кандида альбіканс має характер почкующихся дріжджових клітин або короткого гіллястого міцелію з невеликим числом спір (рис. 10). Кристали Шарко - Лейдена - безбарвні ромбічні кристали різної величини (рис. 9), що утворюються з продуктів розпаду еозинофілів, зустрічаються в мокроті поряд з великою кількістю еозинофілів при бронхіальній астмі, эозинофильных інфільтратах і глистових інвазіях легені. Еозинофіли в нативному препараті відрізняються від інших клітин великою блискучою зернистістю, вони краще помітні в мазку, пофарбованому послідовно 1% розчином еозину (2-3 хв.) і 0,2% розчином метиленового синього (0,5 хв.) або по Романовському - Гімзе (рис. 16). При останній забарвленням, а також при фарбуванні за Травня - Грюнвальду розпізнають пухлинні клітини (рис. 21).
Рис. 9. Спіралі Куршмана (вгорі) і кристали Шарко-Лейдена в мокроті (нативний препарат). Рис. 10. Candida albicans (у центрі) - почкующиеся дріжджоподібні клітини і міцелій зі спорами в мокроті (нативний препарат). Рис. 11. Клітини мокротиння (нативний препарат): 1 - лейкоцити; 2 - еритроцити; 3 - альвеолярні макрофаги; 4 - клітини циліндричного епітелію. Рис. 12. Клітини серцевих вад в мокроті (реакція на берлінську лазур). Рис. 13. Клітини серцевих вад в мокроті (нативний препарат). Рис. 14. Друза актиноміцетів в мокроті (нативний препарат). Рис. 15. Еластичні волокна в мокроті (забарвлення еозином). Рис. 16. Еозинофіли в мокроті (фарбування по Романовському - Гімзе): 1 - еозинофіли; 2 - нейтрофіли. Рис. 17. Пневмококи і в мокроті (забарвлення за Грамом). Рис. 18. Диплобациллы Фрідлендера в мокроті (забарвлення за Грамом). Рис. 19. Паличка Пфейффера в мокроті (забарвлення фуксином). Рис. 20. Мікобактерії туберкульозу (забарвлення по Цилю - Нельсену). Рис. 21. Конгломерат ракових клітин в харкотинні (забарвлення по Травню - Грюнвальду).
Мікроскопічне дослідження включає вивчення нативних і забарвлених препаратів. Для приготування нативного препарату М. наливають тонким шаром в чашки Петрі і на темному тлі відбирають гнійні, кров'янисті, крошковатые грудочки покручені білі нитки, переносять їх на предметне скло, накривають покривним. При дослідженні нативного препарату можна виявити клітинні елементи, еластичні волокна, спіралі Куршмана, кристалічні утворення, тварин і рослинних паразитів.
При малому збільшенні виявляють спіралі Куршмана у вигляді тяжів слизу різної величини, що складаються з центральної осьової нитки і спіралеподібно огортаючої її мантії (цветн. рис. 9). В останню нерідко вкраплені лейкоцити, клітини циліндричного епітелію, кристали Шарко-Лейдена. Осьова нитка при поворотах микровинта яскраво блищить, то стає темною, може бути непомітна, а часто видно тільки вона одна. Спіралі Куршмана з'являються при спазмі бронхів, частіше всього при бронхіальній астмі, рідше при пневмоніях, раку.
При великому збільшенні виявляють наступне. Лейкоцити завжди присутні в мокроті, їх багато при запальних та гнійних процесах; серед них зустрічаються еозинофіли (при бронхіальній астмі, астмоидном бронхіті, глистових інвазіях легких), що відрізняються великою блискучою зернистістю (цветн. рис. 7). Поодинокі еритроцити можуть бути в будь М., їх може бути багато при руйнуванні тканини легені, при пневмонії і застої крові в малому колі кровообігу. Епітелій плоский - великі полігональні клітини з малим ядром, що потрапляють в М. з глотки і порожнини рота, діагностичного значення не мають. Епітелій циліндричний миготливий з'являється в М. в значній кількості при ураженнях дихальних шляхів. Поодинокі клітини можуть бути в будь М., вони подовженої форми, один кінець загострений, інший - тупий, несе війки, які виявляються тільки у свіжій М.; при бронхіальній астмі зустрічаються округлі групи цих клітин, оточені рухомими віями, надають їм схожість з реснитчатыми інфузоріями. Альвеолярні макрофаги - округлі клітини в 2-4 рази більше лейкоцита з 1-2 ядрами, часто прикритими рясними цитоплазматичними включеннями, які можуть бути безбарвними, чорними від частинок вугілля (пилові клітини), жовто-коричневими від гемосидерину («клітини серцевих вад», сидерофаги). Клітини злоякісних пухлин можуть бути визначені в нативному препараті при різко вираженій їх атипії (великі клітини неправильної форми з великим ядром, іноді 2-3 ядрами різної величини і форми); більш переконливі для діагностики раку легені комплекси поліморфних клітин або описаного вище характеру, або дрібних, з чітко окресленими ядрами і іншим, ніж у інших клітин М., коефіцієнтом заломлення світла. Ще найвірогідніше визначення клітин злоякісних пухлин в забарвлених препаратах. Еластичні волокна з'являються в М. при розпаді легеневої тканини. Це тонкі двуконтурний волоконця, вигнуті, дихотомічно розгалужені, розташовані пучками, нерідко кільцеподібними. В нативному препараті зустрічаються рідко, для виявлення їх концентрують: до декількох мілілітрів мокротиння додають рівну кількість 10% розчину їдкого лугу, нагрівають до розчинення слизу, остуджують і наливають в центріфужную пробірку, в яку налито 5-7 крапель 1% спиртового розчину еозину, центрифугують. Осад микроскопируют. Еластичні волокна виділяються яскравою червоною забарвленням (цветн. рис. 11). Гельмінти в М. виявляються рідко, кілька частіше зустрічаються їхні яйця, а при прориві эхинококкового міхура - сколекси, гаки, обривки оболонки; іноді з М. виділяються мігруючі личинки аскарид. З найпростіших зрідка зустрічаються амеби (Entamoeba gingivalis), трихомонади і токсоплазми. З рослинних паразитів найбільше значення мають променисті, дріжджові і цвілеві грибки. Для виявлення променистого грибка (актиномицета) в М. відшукують дрібні жовтуваті щільні крупинки (друзи), переносять їх на предметне скло в краплю гліцерину або лугу і роздавлюють під покривним склом. Характерним для друзи є що складається з сплетення міцелію центральна частина оточена зоною променисто розташованих колбовидных утворень (цветн. рис. 12). При фарбуванні розчавленої друзи за Грамом міцелій набуває фіолетовий, колбочки - рожевий колір. З дріжджових грибків найбільше значення має Candida albicans. В нативних препаратах виявляють почкующиеся клітини і короткий розгалужений міцелій, на якому спори розташовані колотівками (цветн. рис. 10). Цвілеві грибки (шукати в свіжою М.) мають широкі нитки міцелію і круглі зеленкуваті суперечки. На середовищі Сабуро дають характерне зростання. Кристали Шарко - Лейдена - безбарвні октаэдры різної величини, утворюються при розпаді еозинофілів; кристали гематоидина буро-червоні, ромбічні або голчасті з'являються після легеневих крововиливів; кристали холестерину, жирних кислот і мил (див. рис. до ст. «Кал») - при тривалому застої гнійної або гнильної М.
Цитологічне дослідження. Вивчають нативні і пофарбовані препарати. Для дослідження клітин грудочки мокротиння обережно розтягують на предметному склі за допомогою лучини. При пошуках пухлинних клітин матеріал відбирають у нативному препараті. Висохлий мазок фіксують метанолом і фарбують по Романовському - Гімзе (або по Папаніколау). Ракові клітини характеризуються гомогенної, іноді вакуолизированной цитоплазмою від сіро-блакитного до синього кольору, великим пухким, а нерідко гіперхромними, фіолетовим ядром з ядерцями. Ядер може бути 2-3 і більше деколи вони неправильної форми; характерний поліморфізм ядер в одній клітці.
Найбільш переконливі комплекси поліморфних клітин описаного характеру (цветн. рис. 13 і 14). Еозинофіли фарбують або по Романовському - Гімзе, або послідовно 1% розчином еозину (2 хв.) і 0,2% розчином метиленового синього (0,5-1 хв.).
