Не завжди, однак, вдається виявити трихомонади і в забарвлених препаратах, особливо з уретральних виділень у чоловіків. Іноді при мікроскопічному дослідженні виявляються безжгутиковые, нерухомі, круглої форми освіти, схожі з трихомонадами. Б. Ф. Печерський (1958) зазначає, що подібних утворень зустрічається до 30%. і їх важко відрізнити від трихомонад. У таких підозрілих випадках і у хворих з підозрою на трихомоноз при необнаружении паразита мікроскопічним шляхом проводять культуральне дослідження патологічного матеріалу.
Культуральний метод діагностики тріхомоноза останнім часом придбав багато прихильників. Його рекомендують Т. Р. Горбовская (1955), Б. А. Теохаров, М. В. Левинштейн і Д. Р. Розен (1959) та ін Деякі ж автори (Б. П. Метальников, Т. А. Кислова, 3. А. Лесина, 1959) вважають, що при дослідженні уретральних виділень у чоловіків трихомонади культуральна діагностика не має переваг перед мікроскопічним дослідженням. Такої ж думки дотримується М. Л. Кисельова (1956) і ін
Поживні середовища для вирощування в лабораторних умовах трихомонад, запропоновані різними авторами в різних модифікаціях, широко використовуються при вивченні біологічних властивостей і особливостей паразита, а також діагностики тріхомоноза. Розмноження піхвових трихомонад в штучних умовах залежить від цілого ряду факторів: температури, реакції середовища, достатнього харчування, стерильності середовища до і після засіву.
З численних поживних середовищ найбільш популярними є два середовища: Павлової і Джонсона-Трассела, що застосовуються в різних модифікаціях. Середа Павлової не є елективної. На ній виростає і супутня флора. Середа Павлової містить фізіологічний розчин, кінську сироватку, буферний розчин фосфорнокислих солей (0,6354 р однометаллического фосфорнокислого калію і 0,3564 р двуметаллического фосфорнокислого натрію) і рисовий крохмаль. Середа Джонсона-Трассела була вдосконалена в 1943 році Johnson і в літературу ввійшла як середовище СР1М. Склад її наступний: 20% печінкового настою, 20% сироватки крові людини, 2% пептона, 0,1% агару, 0,1% мальтози, 0,15% солянокислого цистеїну, 60% розчину Рінгера (NaCl 6,5 р., КCl 0,14 г, СаCl2 0,12 г, NaHCO3 0,2 м і до 1 л дистильованої води) і 0,002% метиленової сині. Найкращі умови росту в такий живильному середовищі створюються при рН 6-7,5 і температурі 37-39°.
Чисту культуру трихомонад на модифікованому живильному середовищі Джонсона-Трассела отримували Ю. X. Терас (1954), Б. А. Теохаров, Р. М. Пароникян (1954), С. А. Паєвський (1957) та ін. Автори, які працювали з оригінальною середовищем Джонсона-Трассела, а також з її модифікаціями, одностайно відзначають перевагу культуральної діагностики над діагностикою мікроскопічної навіть у випадках, коли проводиться паралельний перегляд пофарбованих і нативних препаратів.
Б. А. Теохаров (1959) запропонував для культуральної діагностики тріхомоноза у жінок спрощену живильне середовище, що складається з печінкового настою (20%), кров'яної сироватки або асцитичної рідини (20%), глюкози (0,05%), фізіологічного розчину (59,6%) з додаванням пеніциліну та стрептоміцину по 50 ОД на 1 мл середовища. Користуючись спрощеною середовищем для культуральної діагностики, автор зміг підвищити частоту виявлення трихомонад на 16,6%.
Ю. X. Терас (1954) рекомендує для культуральної діагностики тріхомоноза живильне середовище, до складу якої входить печінковий бульйон (20 мл), розчин Рінгера (600 мл), потім послідовно додають пептон (20 г), агар - агар (1 г) і солянокислий цистеїн (1,5 г). Суміш стерилізується при 120° протягом 20 хв. Після фільтрування у гарячому вигляді через фільтрувальний папір додають до фільтрату мальтозу (5 г), після чого середовище стерилізують при 105° протягом 20 хв. До охолодженої середовищі додають 200 мл стерильної інактивованої сироватки людської крові. Реакцію середовища доводять до рН 6,0-6,3 і розливають у стерильні пробірки. Для одержання чистих культур додають до 1 мл середовища за 2500 ОД пеніциліну і стрептоміцину. Після 48-72-годинного вирощування при температурі 37° культуру пересівають на таку ж живильне середовище з додаванням такої ж кількості пеніциліну і стрептоміцину (пеніцилін і стрептоміцин розчиняють в розчині Рінгера з рН 6,0-6,3). Після 48-72-годинного вирощування культури при температурі 37° проводиться ще раз пересів на таку ж живильне середовище, але без додавання антибіотиків.
