Близькі дані отримали Д. П. Гриньов і Т. І. Іванова (1936), які досліджували вплив механічного чищення зубів на мікрофлору порожнини рота. Автори прийшли до висновку, що механічна чистка зубів пастою і порошком хоча і не значно знижує кількості нормальної мікрофлори порожнини рота, але обмежує її ріст і розмноження, очищає рот від їжі, слизу і, таким чином, усуває умови для збільшення кількості мікроорганізмів. Автори досліджували порошки на забрудненість і встановили, що зубний порошок містить у значній кількості кокова і палочковые мікробні форми. Пізніше ці дані знайшли підтвердження в роботі Ст. Е. Гофунг (1943).
Candeli (1954), Menges (1957), Shklair з співавт. (1957) вивчали вплив зубних паст та їх компонентів на мікрофлору порожнини рота, а Д. Странскі з соавт (1956) дослідили антимікробну вплив паст і ряду їх активно діючих складових частин культури золотистого стафілокока, білого стафілокока, кишкової палички, білої та жовтої сарцини та ін. Автор поміщав проби паст на агар в спеціальні ямки і визначав їх дію по зонах розрядження або відсутності зростання.
В. І. Ребров (1964) при оцінці дії зубних порошків з домішками хлористого амонію і карбаміду визначав кількість лактобактерій в слині, встановив їх «титр», тобто найбільше розведення досліджуваного препарату, в якому ще можливо виявити мікроорганізми при посівах на томатний бульйон і томатний агар. Крім того, автор досліджував ясенної наліт, щоб мати загальне уявлення про мікрофлорі порожнини рота при дії порошків.
Ю. А. Федоров, Л. А. Бланк (1964), Ю. А. Федоров із співавт. (1965, 1969, 1970) використовували при вивченні властивостей зубних порошків і паст цілий комплекс мікробіологічних досліджень. По-перше, в пастах і порошках визначали наявність мікроорганізмів, потім перевіряли їх на вміст бактерій кишкової групи, гноєтворних коків, спорових мікроорганізмів, плісеневих грибків і дріжджів. По-друге, досліджували бактерицидність зубних порошків і паст контактним методом і методом дифузії в агар.
На підставі проведених досліджень можливо дати оцінку зубним гігієнічних засобів, зіставити їх дію in vivo та in vitro.
Про важливість бактеріологічних досліджень при вивченні засобів гігієни порожнини рота свідчать дані та ряду інших авторів (Loe з співавт., 1965; Riethe, 1965а, Ь; А. В. Марченко з співавт., 1967, 1968, 1971; Tanaka з співавт., 1968; Kobylanska, 1969; Ю. А. Федоров, 19706; В. Н. Корінь з співавт., 1971; Н. Ст. Морозова, Л. В. Морозова, 1971, і ін). На підставі наведеного огляду можна вважати, що мікробіологічні дослідження необхідні при вивченні властивостей зубних гігієнічних засобів та визначення їх дії на мікрофлору порожнини рота, отже, вони повинні входити в комплекс заходів з апробації нових препаратів.
Важливе значення надається експериментальними дослідженнями на тваринах. Саме з їх допомогою визначають токсичність окремих компонентів і готових - гігієнічних форм, а також противокариозную ефективність. Ці дослідження або можуть обмежуватися вивченням розвитку, приросту ваги, стану внутрішніх органів, або охоплюють значно більший обсяг роботи, включаючи гістологію і гистохимию тканин ясен, емалі і дентину зубів, шкіри (Carter, 1956; Saxe з співавт., 1967; Crossland з співавт., 1967; Ю, А. Федоров із співавт., 1970; Greene з співавт., 1971, і ін), вивчення показників пародонтопатій, карієсу зубів і слиновиділення (Lasansky, 1947; Chernausek, Mitchell, 1950, 1951; Kronke, 1961; Konig, Muhlemann, 1961; Muhlemann, Konig, 1961; Boyers з співавт., 1963; Sarvdir, Konig, 1964; Konig, 1964, Konig, з співавт., 1964; Ю. А. Федоров, 1965a, б, в, 1966, 1970а, 1971; Crossland з співавт., 1967; Stralforst з співавт., 1967; Englander, Keyes, 1967; Kinkel, 1968; Rovin з співавт., 1971, і ін), включення радіоактивних ізотопів, проникнення мікроелементів у тверді тканини зубів і їх розчинність (Konig з співавт., 1964; Ю. А. Федоров, Р. М. Коган, 1969; Ю. А. Федоров, 1971; Л. X. Барон, П. А. Леус, 1971; Ю. А, Федоров, В. М. Дмитрієв, 1972, і ін) в залежності від дії тих чи інших зубних паст. Вибір методу в даному випадку залежить від поставленого завдання і кінцевої мети планованих досліджень.