Один і той же фермент може бути представлений у двох і більше молекулярних варіантах - изоэнзимах. Наприклад, ГГТП включає зародкову (F) і дорослу (L) молекулярні форми. У здорової дорослої людини в печінці переважає L-форма, а при розвитку жирової дистрофії печінки - F-форма ГГТП. Топографія ферментів, тобто зміст кожного ферменту в різних відділах печінкової часточки (ацинуса), різна. Найбільша кількість АлАТ зосереджено в гепатоцитах, прилеглих до портальних трактах (1-я зона ацинуса), а найбільша кількість ГДГ - в гепатоцитах, розташованих навколо центральних вен (3-я зона ацинуса).
В нормальних умовах освіта і розпад ферментів, що містяться в гепатоцитах, збалансовані, і лише мінімальні їх кількості залишають клітку і потрапляють в систему кровообігу - активність печінкових ферментів крові низька, так як біологічно активні ферменти надійно укладені в численних мембранних відсіках цитоплазми і в цитозолі. При прямому або опосередкованому клітинної імунної реакцією ураженні клітин печінки найбільш рано пошкоджуються зовнішня клітинна мембрана і мембрани органел, проникність мембран для різних з'єднань підвищується: внутрішньоклітинні ферменти легко залишають клітку, проникають в міжклітинні простори і струм крові: активність відповідних ферментів у крові наростає порівняно з нормальною пропорційно ступеня і поширеності ураження клітин печінки, іноді в десятки, сотні і навіть тисячі разів. Разом з тим підвищення активності того чи іншого ферменту крові залежить не тільки від ступеня ураження печінкової клітини, але і від викликала його причини та від того, які саме структури гепатоцитів і в якому відділі печінкової часточки найбільш постраждали в результаті дії причинного агента. Наприклад, при гострому вірусному гепатиті (хвороби Боткіна) і при хронічних вірусних гепатитах в крові переважно підвищується активність цитозольного ферменту - АлАТ і в меншій мірі активність цитозольной фракції АсАТ. При алкогольних ураженнях печінки найбільш ранньою ознакою є підвищення активності ГГТП і зародкової її ізоформи, що відбиває наявність жирової дистрофії печінки. При важких алкогольних ураженнях гепатоцитів, захоплюючих мітохондрії, особливо часто при гострому алкогольному гепатиті, в крові підвищується активність мітохондріальних ферментів - ГДГ і мітохондріальної фракції АсАТ. При алкогольному ураженні активність АсАТ крові підвищена більшою мірою, ніж активність АлАТ; при вірусних захворюваннях печінки спостерігається переважання активності АлАТ.
Численні білки, розчинені в сироватці крові *, відрізняються за структурою, молекулярної маси, розчинності у воді, осаждаемости в насиченому до 50% розчині сірчанокислого амонію, електрофоретичної рухливості і виконуються в організмі функцій. За фізико-хімічними властивостями розрізняють два основних класи білків крові: альбуміни і глобуліни. Альбуміни складають близько 60% всіх білків сироватки. Вони добре розчиняються у воді й осідають тільки в насиченому до 50% розчині сірчанокислого амонію. Глобуліни складають у нормі не більше 40% білків сироватки (співвідношення альбумінів і глобулінів - альбуминово-глобуліновий коефіцієнт - 1,5-2). Вони нерозчинні у чистій воді і менш стійкі в слабких розчинах солей: осаджуються при додаванні сірчанокислого амонію до полунасыщения. Найбільш поширеним методом розділення суміші білків сироватки на окремі компоненти з наступним визначенням концентрації кожного білка є електрофорез. Колоїдні білкові частинки переміщуються в електричному полі зі швидкостями, які залежать від величини молекулярної маси та інших фізико-хімічних властивостей білків. При електрофорезі сироватки крові різниця потенціалів прикладають до протилежних кінцях смужки фільтрувального паперу, просоченого сироваткою. Найбільш швидко мігрує альбумін. Глобуліни також розподіляються в порядку спадання електрофоретичної активності на фракції α-, β - і γ-глобулінів - остання з найбільшою величиною молекули. Після закінчення електрофорезу папір забарвлюють спеціальними барвниками і за кількістю фарби, поглиненої кожної білковою фракцією, судять про концентрацію відповідного білка.
При захворюваннях печінки особливо велике значення має визначення вмісту альбумінів і Т-глобулінів крові. Альбумін в кількості близько 14 г на добу утворюється тільки у печінці з амінокислот крові. Значно знижується рівень альбуміну та інших синтезуються печінкою білків (протромбін, фібриноген) при тяжких ураженнях печінки, зазвичай на пізніх стадіях цирозу печінки. Зниження рівня альбуміну, можливо, також при голодуванні і занепаді живлення.
* Сироваткою називають рідку частину крові, що залишається після видалення клітин крові і згустку фібрину.
Сторінки: 1 2 3 4 5 6