Подальші експериментальні дослідження і клінічні спостереження, однак, показали, що, незважаючи на безсумнівно негативний вплив неправильного харчування на структуру і функцію печінки, одним дефіцитом «ліпотропних факторів» або будь-яких інших продуктів пояснити важкі ураження печінки в алкоголіків неможливо. З'ясувалося, що обмін холіну у людини, а також у приматів і у щурів досить різний: в печінки щура є висока активність ферменту, що розщеплює холін (холиноксидазы), в печінці людини і мавпи цей фермент виявляється в мізерно малих кількостях, тому недостатність холіну у людини практично не спостерігається. Дефіцит метіоніну у людини також можливий тільки при повному голодуванні.
У 60-х роках у Франції, ФРН та інших країнах були проведені дослідження людей, які зловживали алкоголем. Вони показали, що ризик розвитку алкогольного цирозу печінки достовірно визначається величиною щоденної дози абсолютного алкоголю і тривалістю її запровадження*.
Рис. 16. Частота розвитку різних форм алкогольних уражень печінки серед 334 хворих хронічним алкоголізмом в залежності від середньої щоденної дози алкоголю і тривалості його споживання (W. Zelbach, 1975)
Французький епідеміолог Ж. Пекиньо в 1960 р. встановив, що тільки 1 з 1160 хворих алкогольним цирозом печінки вживав Менше 80 г чистого алкоголю на добу, що відповідає 1 л вина, 2 л пива або 265 см3 міцних спиртних напоїв. При вживанні цієї дози алкоголю жінки хворіли цирозом значно частіше, ніж чоловіки. Пізніше, в 1974 р. Пекиньо показав, що ризик розвитку цирозу у чоловіків особливо великий при щоденній дозі алкоголю більше 40 г, а у жінок - понад 20 р. При одній і тій же дозі алкоголю ризик розвитку цирозу у жінок був принаймні в 35 разів вище, ніж у чоловіків. Дослідник з ФРН К. Лелбах в 1975 р. зіставив у великій групі хворих алкоголізмом величину добової дози алкоголю і тривалість його вживання з морфологічними змінами тканини печінки. Хворим через певні інтервали часу проводилася пункція печінки тонкою голкою з витягом циліндрика печінкової тканини, придатного для мікроскопічного дослідження. Було встановлено, що частота та важкість алкогольного ураження печінки наростають у міру збільшення періоду вживання алкоголю і його дози (рис. 16). Протягом перших років у більшості хворих виявлялася тільки жирова дистрофія печінки. Далі різко зростала частота «предцирротических» уражень печінки - важкого стеатофиброза (поєднання жирової дистрофії з прогресуючим фіброзом печінки) і хронічного алкогольного гепатиту. При цьому ступінь жирової дистрофії зменшувалася. Пізніше, через 8-10 років систематичного зловживання алкоголем починала безперервно збільшуватися ймовірність захворювання на цироз печінки. До кінця 20-річного періоду розвинувся цироз майже у 50% хворих. Американський дослідник М. Томас вважає, що цироз печінки розвивається після вживання приблизно 1750 л алкоголю протягом 20 років.
Остаточним доказом прямої токсичної дії алкоголю на печінку, навіть на тлі повноцінної дієти, послужили проведені в 70-х роках американськими дослідниками С. Либером, X. Поппером та іншими досліди на мавпах і людях - добровольцях, які отримували строго контрольовану повноцінну дієту з нормальним або навіть вищими за норму кількістю білка, вітамінів та інших інгредієнтів. Тварини отримували рідку їжу, в якій частина вуглеводів (до 50% загальних калорій) була заміщена рівним за калорійної цінності кількістю алкоголю. Через певні інтервали часу хірургічним шляхом отримували шматочки печінки для мікроскопічного дослідження. В якості контролю служили мавпи, які отримували аналогічну дієту без алкоголю. Вже через місяць у печінці мавп дослідної групи у 8 разів збільшувався вміст нейтрального жиру (тригліцеридів) і при мікроскопії печінкових зрізів виявлялися різко виражена жирова дистрофія. Зниження вмісту жиру в дієті до 25% загальних калорій або повне його усунення на фоні введення алкоголю не знижувало ступеня ожиріння печінки, тобто жир при алкогольній інтоксикації накопичувався в печінці не тільки за рахунок зовнішніх джерел, але й в результаті підвищення синтезу в організмі. Надалі у 1/3 тварин в терміни від 9 до 12 місяців розвивався алкогольний гепатит, тобто дистрофія і некрози гепатоцитів центральних відділів печінкових часточок з фиброзированием і запальною реакцією.
